سڌو RT-qPCR کٽ
کٽ جي وضاحت:
◮ Direct RT-qPCR Kit، Foreasy Reverse Transcriptase ۽ Foreasy HS Taq DNA Polymerase استعمال ڪندي Foregene پاران تيار ڪيل، منفرد رد عمل جي بفر سان، ھن کٽ کي مضبوط مزاحمت ۽ مطابقت سان ٺاھيو آھي، ۽ اھو سڌو سنئون رد عمل کي آزمائي سگھي ٿو Foregene Lysis سسٽم کي ٽيمپليٽ طور استعمال ڪري.هي ڪٽ COVID-19 نيوڪليڪ ايسڊ ڊيٽڪشن ڪٽ ۽ ٻين پيٽروجنڪ بيڪٽيريا نيوڪليڪ ايسڊ ڊيٽڪشن ڪٽ ڊولپمينٽ لاءِ لاڳو ٿي سگهي ٿي.
وصف
سڌو RT-qPCR کٽ مهيا ڪري ٿي الڳ الڳ پيڪيج ٿيل RT-qPCR بفر ۽ اعلي موثر اينزيممرکب (Taq、M-MLV、RI)، انهي کي آسان بنائڻ لاءِ پٺتي پيل ڪِٽس ۽ سسٽم ٺاهڻترتيب ڏيڻ، سادي تصديق جي اندر.
وضاحتون
500T، 50,000T
کٽ جا اجزاء
| کٽ جو مواد (20 μL ردعمل سسٽم) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ٽي | 50,000 ٽي | |
| سڌو اينزيم مرکب | 500 μL×1 | 50 مليل×1 |
| 2 × سڌو RT-qPCR بفر | 1 ايم ايل×5 | 500 مليل×1 |
| هدايت | 1 | 1 |
آپريٽنگ مرحلا
ريجينٽ تيار ڪرڻ کان اڳ، کٽ ۾ موجود سڀني ريجنن کي ڪمري جي حرارت تي پگھلايو وڃي ۽ نرميءَ سان ملايو وڃي.
A: تيار ڪرڻ of ٽيمپليٽ ۽ رياڪار
1. تيار ڪيل آر اين اي ٽيمپليٽ تيار ڪريو (آر اين اي ٽيمپليٽ کي ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ Foregene Total RNA Isolation Kit سيريز کٽ استعمال ڪرڻ جي سفارش ڪئي وئي آهي) يا سيمپل ڪيڪنگ پراڊڪٽ (اهو سفارش ڪئي وئي آهي ته Foregene Lysis سسٽم استعمال ڪيو وڃي)، مخصوص پرائمر (10 μM) ۽ ٻيا لاڳاپيل استعمال ٿيندڙ سامان، اوزار.
2. 2× Direct RT-qPCR بفر، RNase-Free ddH2O ۽ 20× ROX ريفرنس ڊائي (جيڪڏهن اهو's جي ضرورت آهي) برف سان دٻي ۾، انهن کي قدرتي طور تي ڳري، ۽ نرمي سان ملايو.
B: تيار ڪرڻ of RT-qPCR سسٽم
ٽيبل 1 : تيار ڪرڻ of RT-qPCR sسسٽم
| جزو | حجم | آخري ڪنسنٽريشن |
| 2 × سڌو RT-qPCR بفر | 10 μL | 1× |
| سڌو اينزيم مرکب | 1μL | |
| فارورڊ پرائمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ريورس پرائمر (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| تحقيق (4 μM) | 1μL | 200nM |
| سانچو(RNA يا Lysate) | ايڪس μL | |
| 20 × ROX حوالو رنگ | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| ڪل مقدار | 20μL |
C: مقرر جي RT-qPCR ردعمل پروگرام
ٽيبل 2 : RT-qPCR رد عملon پروگرام سيٽنگ (لاءِ مثال: ٻه-قدم طريقو)
| قدم | گرمي پد | وقت | سائيڪلون | مواد | |
| 1 | 50 ℃ | 15 منٽ | 1* | 1 | ريورس ٽرانسپشن |
| 2 | 95 ℃ | 1 منٽ | 1 | اڳواٽ ٺهڻ | |
| 3 | 95 ℃ | 10 سيڪنڊ | 40-45 | رد ڪرڻ | |
| 60 ℃ | 30 سيڪنڊ 2* | انيل / واڌ | |||
اسٽوريج ۽ شيلف زندگي
ڪٽ -20 تي ذخيرو ٿيڻ گهرجي± 5℃.صحيح مدت 12 مهينا آهي.
بار بار منجمد ڪرڻ واري چڪر کان پاسو ڪريو (<5 چڪر).
