Animal Total RNA Isolation Kit Total RNA Extraction and Purification Kits for Animal Tisues & Cell
کٽ جي وضاحت:
جلدي ۽ موثر طور تي مختلف جانورن جي بافتن مان اعليٰ پاڪائي ۽ اعليٰ معيار جي ڪل آر اين اي ڪڍيو.
آر اين اي جي تباهي بابت پريشان ٿيڻ جي ضرورت ناهي.سڄو سسٽم RNase-مفت آهي
مؤثر طريقي سان ڊي اين اي صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي استعمال ڪندي ڊي اين اي کي هٽايو
DNase شامل ڪرڻ کان سواءِ ڊي اين اي هٽايو
سادو- سڀ عمل مڪمل ڪيا ويا ڪمري جي حرارت تي
فاسٽ آپريشن 30 منٽن ۾ مڪمل ٿي سگھي ٿو
محفوظ - ڪو به نامياتي ريجنٽ استعمال نه ڪيو ويو
اعلي پاڪائي-OD260/280≈1.8-2.1
ڪتن جي وضاحت
50 تياريون، 200 تياريون
هي ڪٽ استعمال ڪري ٿواسپن ڪالم ۽ فارمولااسان جي ڪمپني پاران تيار ڪيل آهي، جيڪا اعليٰ ڪارڪردگيءَ سان جانورن جي مختلف بافتن مان اعليٰ پاڪيزگي ۽ اعليٰ معيار جي ڪل آر اين اي ڪڍي سگهي ٿي. اهو هڪ موثر ڊي اين اي-ڪليننگ ڪالمن مهيا ڪري ٿو، جيڪو آسانيءَ سان جينومڪ ڊي اين اي کي سپرنيٽنٽ ۽ ٽشو ليسيٽ کان الڳ ۽ جذب ڪري سگهي ٿو، سادو ۽ وقت جي بچت؛آر اين اي صرف ڪالمن موثر طريقي سان آر اين اي کي پابند ڪري سگهي ٿو ۽ هڪ ئي وقت ۾ پروسيس ڪري سگهجي ٿو هڪ منفرد فارمولا سان گڏ ڪيترائي نمونا.
سڄو سسٽم RNase-Free آهي، تنهنڪري ڪڍيل آر اين اي خراب نه ٿئي.بفر RW1، بفر RW2 بفر واشنگ سسٽم، ته جيئن حاصل ڪيل آر اين اي پروٽين، ڊي اين اي، آئن، ۽ نامياتي مرڪب آلودگي کان پاڪ هجي.
کٽ جا اجزاء
| جانورن جي ڪل آر اين اي آئسوليشن کٽ | ||
| کٽ جا اجزاء | ري-03011 | ري-03014 |
| 50 ٽي | 200 ٽي | |
| بفر RL1* | 25 ملي | 100 ملي |
| بفر RL2 | 15 ملي | 60 ملي |
| بفر RW1* | 25 ملي | 100 ملي |
| بفر RW2 | 24 ملي | 96 ملي |
| RNase-مفت ddH2O | 10ml | 40 ملي |
| آر اين اي صرف ڪالمن | 50 | 200 |
| ڊي اين اي-صفائي ڪالمن | 50 | 200 |
| ھدايت وارو دستور | 1 ٽڪرو | 1 ٽڪرو |
پيداوار جي ڄاڻ
| فارميٽ | گھمڻ وارو ڪالم | صفائي جو جزو | فورجيني ڪالم ، ريجنٽ |
| وهڪري | 1-24 نموني | وقت في تياري | ~30 منٽ (24 نمونا) |
| سينٽريفيوج | ڊيسڪ سينٽرفيوج | pyrolysis جدائي | مرڪزي ڌار ڌار |
| نمونو | جانورن جي بافتو؛سيل | نموني جي مقدار | ٽشو: 10-20 mg؛سيل: (1-5) × 106 |
| Elution حجم | 50-200 μL | وڌ ۾ وڌ لوڊ ڪرڻ جو مقدار | 850 μL |
خاصيتون ۽ فائدا
■ آر اين اي جي تباهي بابت پريشان ٿيڻ جي ضرورت ناهي؛سڄو سسٽم RNase-مفت آهي
■ مؤثر طريقي سان ڊي اين اي استعمال ڪندي ڊي اين اي-صفائي ڪالمن کي هٽايو
■ ڊي اين اي شامل ڪرڻ کان سواءِ ڊي اين اي هٽايو
■ سادو- سڀ آپريشن ڪمري جي حرارت تي مڪمل ڪيا وڃن ٿا
■ فاسٽ آپريشن 30 منٽن ۾ مڪمل ٿي سگھي ٿو
■ محفوظ- ڪا به نامياتي ريجنٽ گهربل ناهي
■ اعلي پاڪائي -OD260/280≈1.8-2.1
ڪٽ ايپليڪيشن
اهو مختلف قسم جي تازي يا منجمد جانورن جي بافتن يا ڪلچر ٿيل سيلز مان ڪل آر اين اي کي ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ موزون آهي.
پيداوار جي ماپ
■ ڊائون اسٽريم ايپليڪيشنون: فرسٽ اسٽرينڊ سي ڊي اين اي سنٿيسس، آر ٽي پي سي آر، ماليڪيولر ڪلوننگ، ناردرن بلٽ، وغيره.
■ نمونا: جانورن جي ٽشوز، ڪلچر ٿيل سيلز
■ دوز: ٽشوز 10-20mg، سيل (2-5) × 106
■ وڌ ۾ وڌ ڊي اين اي بائنڊنگ جي گنجائش صاف ڪرڻ واري ڪالمن جي: 80 μg
■ ايليوشن حجم: 50-200 μl
خاڪو
Animal Total RNA Isolation Kit جو علاج ڪيو ويو 20mg
تازو ماؤس جا نمونا، وٺو 5٪ پاڪ ڪل آر اين اي 1٪ آگر
Glycogel electrophoresis
1: Spleen 2: گردو
3: جگر 4: دل
اسٽوريج ۽ شيلف زندگي
کٽ کي 24 مهينن لاءِ ڪمري جي گرمي پد (15–25 ℃) يا 2–8 ℃ تي گهڻي وقت تائين محفوظ ڪري سگهجي ٿو.بفر RL1 β-mercaptoethanol (اختياري) شامل ڪرڻ کان پوء 1 مهيني لاء 4 ℃ تي ذخيرو ٿي سگھي ٿو.
حوالا ڏنل مضمون
1.IF: 18.808:Zheng، Q.، Qin، F.، Luo، R.، et al.mRNA-لوڊ ٿيل لپڊ-جهڙوڪ نانو ذرات ليور بيس ايڊيٽنگ لاءِ سينٽرل ڪمپوزٽ ڊيزائن جي اصلاح ذريعي.Adv.فنڪشن.ميٽر.2021، 31، 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF: 18.187:هي ايڪس، هانگ ڊبليو، يانگ جي، وغيره.علاج واري اسٽيم سيل جي تياري ۾ سيلز جو خود بخود اپوپوٽوسس فاسفيٽائڊيلسرين جي ڇڏڻ ذريعي امونوموڊوليٽري اثرات کي ظاهر ڪري ٿو.سگنل ٽرانزيڪشن ٽارگيٽ اتي.14 جولاءِ 2021؛ 6(1):270.doi: 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.IF: 17.97:Dai Z، Liu H، Liao J، وغيره.N7-Methylguanosine tRNA ترميمي آنڪوجينڪ mRNA جي ترجمي کي وڌائي ٿي ۽ انٽراهپيٽڪ cholangiocarcinoma جي ترقي کي وڌايو.مول سيل.2021 جولاءِ 29:S1097-2765(21)00555-4.doi: 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225: Cao X، Shu Y، Chen Y، et al.Mettl14-Mediated m6A ترميمي ليور جي بحالي کي آسان بڻائي ٿو Endoplasmic Reticulum Homeostasis کي برقرار رکڻ سان.سيل Mol Gastroenterol Hepatol.2021؛ 12 (2): 633-651.doi: 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
آر اين اي آئسوليشن ڪٽ لاءِ ٻيا نمونا ذريعنموجود آهن:
سيل، ٻوٽو، وائرل، رت، وغيره.
آر اين اي نه ڪڍيو ويو آهي يا آر اين اي جي پيداوار گهٽ آهي
عام طور تي ڪيترائي عنصر آھن جيڪي وصولي جي ڪارڪردگي کي متاثر ڪن ٿا، جھڙوڪ: ٽشو نموني آر اين اي مواد، آپريشن جو طريقو، ايليوشن حجم، وغيره.
1. آئس باٿ يا ڪريوجينڪ (4 °C) سينٽرفيوگريشن آپريشن دوران ڪيو ويو.
سفارش: سڄي عمل دوران ڪمري جي گرمي پد (15-25 ° C) تي ڪم ڪريو، برفاني غسل نه ڪريو ۽ گهٽ درجه حرارت تي سينٽرفيوج.
2. غلط نموني جي بچاءُ يا گھڻي نموني رکڻ جو وقت.
سفارش: نمونن کي -80 °C تي ذخيرو ڪريو يا مائع نائٽروجن ۾ منجمد ڪريو ۽ بار بار منجمد ٿيل استعمال کان پاسو ڪريو؛آر اين اي ڪڍڻ لاءِ تازو ٽشو يا ڪلچر ٿيل سيلز استعمال ڪرڻ جي ڪوشش ڪريو.
3. ناکافي نموني ليسس.
سفارش: جڏهن ٽشو کي هڪجهڙائي ڪرڻ گهرجي، پڪ ڪريو ته ٽشو ڪافي طور تي هڪجهڙائي سان ٺهيل آهي ۽ آر اين اي جي ڇڏڻ جي وضاحت ڪرڻ لاء ٽشو سيلز ڪافي ورهايل آهن.
4. ايليوئنٽ صحيح طرح شامل نه ڪيو ويو آهي.
سفارش: تصديق ڪريو ته RNase-Free ddH2O شامل ڪيو ويو آھي dropwise کي صاف ڪرڻ واري ڪالمن جھلي جي وچ ۾.
5. مطلق ايٿانول جو صحيح مقدار بفر RL2 يا بفر RW2 ۾ شامل نه ڪيو ويو.
سفارش: هدايتن تي عمل ڪريو، Buffer RL2 ۽ Buffer RW2 ۾ مطلق ايٿانول جو صحيح مقدار شامل ڪريو ۽ کٽ استعمال ڪرڻ کان اڳ چڱيءَ طرح ملايو.
6. ٽشو نموني dosage مناسب نه آهي.
سفارش: استعمال ڪريو 10-20 ملي گرام ٽشو يا (1-5) × 106سيلز في 500 μl بفر RL1، جيئن گھڻي ٽشو استعمال ڪرڻ جي نتيجي ۾ آر اين اي جي گھٽتائي ٿي سگھي ٿي.
7. نامناسب ايليوشن حجم يا نامڪمل اخراج.
سفارش: صاف ڪرڻ واري ڪالمن جو ايليوشن حجم 50-200 μl آهي.جيڪڏهن ايليوشن جو اثر اطمينان بخش نه آهي، ته اڳي گرم ٿيل RNase-Free ddH شامل ڪرڻ کان پوءِ ڪمري جي گرمي پد جي مقرري جو وقت وڌائڻ جي سفارش ڪئي ويندي آهي.2اي، مثال طور 5-10 منٽ لاء.
8. صاف ڪرڻ واري ڪالمن ۾ بفر RW2 ڌوئڻ کان پوءِ ايٿانول رهجي وئي آهي.
سفارش: جيڪڏهن Buffer RW2 ڌوئڻ کان پوءِ ايٿانول جي رهجي وئي آهي، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن 1 منٽ لاءِ، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن جو وقت 2 منٽ تائين وڌائي سگھجي ٿو، يا صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ڪمري جي حرارت تي 5 منٽ لاءِ رکي سگهجي ٿو ته جيئن مناسب طور تي ايٿانول کي هٽائي سگهجي.
صاف ٿيل آر اين اي خراب ٿي وئي آهي
صاف ٿيل آر اين اي جي معيار جو تعلق عنصرن سان آهي جهڙوڪ نموني جي حفاظت، آر اين جي آلودگي، ۽ هٿرادو، وغيره.
1. ٽشو جا نمونا وقت ۾ نه رکيا ويا آهن.
سفارش: جيڪڏهن ٽشو جا نمونا يا سيلز گڏ ڪرڻ کان پوءِ بروقت استعمال نه ڪيا ويا آهن، فوري طور تي -80 ° C يا مائع نائٽروجن تي cryopreserve ڪريو.آر اين اي ڪڍڻ لاءِ، جڏهن به ممڪن هجي، نئون ورتو ٽشو يا سيل جو نمونو استعمال ڪريو.
2. ٽشو جي نمونن کي بار بار منجمد ڪرڻ.
سفارش: ٽشو جي نمونن کي ذخيرو ڪرڻ وقت، اهو بهتر آهي ته انهن کي محفوظ ڪرڻ لاء ننڍن ٽڪرن ۾ ڪٽي، ۽ نموني جي بار بار منجمد ٿيڻ ۽ آر اين اي جي خراب ٿيڻ کان بچڻ لاء انهن کي استعمال ڪرڻ وقت انهن مان هڪ ٽڪر ڪڍي ڇڏيو.
3. آپريشن دوران RNase متعارف ڪرايو يا نه پائڻ وارو ڊسپوزيبل دستانو، ماسڪ وغيره.
تجويز: آر اين اي ڪڍڻ جا تجربا بهترين طور تي الڳ الڳ آر اين اي مينيپوليشن ڪمرن ۾ ڪيا ويندا آهن ۽ ميز کي تجربي کان اڳ صاف ڪيو ويندو آهي.
تجربو دوران ڊسپوزيبل دستانو ۽ ماسڪ پائڻ لاءِ آر اين اي جي تباهي کي گھٽائڻ لاءِ جيڪو RNase جي تعارف جي ڪري ٿي.
4. Reagents استعمال دوران RNase سان آلوده آهن.
تجويز: لاڳاپيل تجربن لاءِ نئين اينيمل ٽوٽل آر اين اي آئسوليشن کٽ سان مٽايو.
5. آر اين اي جي ڦيرڦار ۾ استعمال ٿيندڙ سينٽريفيوج ٽيوب، ٽپ وغيره RNase سان آلوده آهن.
سفارش: پڪ ڪريو ته آر اين اي ڪڍڻ ۾ استعمال ٿيندڙ سينٽريفيوج ٽيوب، ٽپس، پائپيٽ وغيره سڀ RNase-مفت آهن.
صاف ٿيل حاصل ڪيل آر اين اي هيٺئين پاسي جي تجربن کي متاثر ڪري ٿو
آر اين اي پيوريفڪيشن ڪالمن ذريعي پاڪ ڪيو ويو آهي، جيڪڏهن لوڻ آئنز، پروٽين جو مواد تمام وڏو آهي ته هيٺئين پاسي واري تجربي کي متاثر ڪندو، جهڙوڪ: ريورس ٽرانسڪرپشن، ناردرن بلٽ وغيره.
1. خارج ٿيل آر اين اي ۾ لوڻ آئن جا باقي بچيل آهن.
سفارش: تصديق ڪريو ته ايٿانول جو صحيح مقدار بفر RW2 ۾ شامل ڪيو ويو آهي ۽ آپريشن لاءِ اشارو ڪيل سينٽرفيوگل اسپيڊ تي 2 صاف ڪرڻ واري ڪالمن واش کي انجام ڏيو؛جيڪڏهن ڪو لوڻ آئن جي باقي رهي ٿي، صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي بفر RW2 تي 5 منٽ لاءِ ڪمري جي حرارت تي ڇڏي ڏيو ۽ لوڻ جي آلودگي کي وڌ کان وڌ ختم ڪرڻ لاءِ سينٽرفيوگريشن انجام ڏيو.
2. خارج ٿيل آر اين اي ۾ ايٿانول جي باقيات.
سفارش: پڪ ڪريو ته بفر RW2 ڌوئڻ کان پوء، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن کي سينٽرفيوگريشن جي رفتار تي انجام ڏيو جيڪو آپريشن لاءِ اشارو ڪيو ويو آهي، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن جو وقت 2 منٽ تائين وڌايو جيڪڏهن اڃا تائين ايٿانول باقي رهي ٿي، يا ان کي ڪمري جي گرمي پد تي 5 منٽ لاءِ ڇڏي ڏيو ٽيوبول سينٽريفيوگريشن جي ايم ڪيو ايم کان پوءِ. آئيڊيو
