ForeDirect RT-qPCR کٽ
کٽ جي وضاحت:
◮آر اين اي لاءِ سڌو حقيقي وقت ۾ swab گڏ ڪرڻ کان سواءِ آر اين اي صاف ڪرڻ واري عمل جي.هي کٽ هڪ ڪلاڪ اندر qRT-PCR چڪر مڪمل ڪري ٿي.Enzyme mix Reverse Transcriptase، Hot-Start Taq DNA polymerase، RNase inhibitor جو هڪ بهتر ٺهيل آهي.ري ايڪشن بفر ۾ تمام ضروري اجزاء شامل آهن، بشمول اصلاحي بفر جزا، Mg2+، dUTP، ۽ dNTPs.
وصف
ForeDirect RT-qPCR کٽ آر اين اي صاف ڪرڻ واري عمل کان سواءِ swab جي مجموعن مان آر اين اي سڌو حقيقي وقت جي واڌ ويجهه لاءِ ٺهيل آهي.هي کٽ هڪ ڪلاڪ اندر qRT-PCR چڪر مڪمل ڪري ٿي.Enzyme mix Reverse Transcriptase، Hot-Start Taq DNA polymerase، RNase inhibitor جو هڪ بهتر ٺهيل آهي.ري ايڪشن بفر ۾ تمام ضروري اجزاء شامل آهن، بشمول اصلاحي بفر جزا، Mg2+، dUTP، ۽ dNTPs.
وضاحتون
100T
کٽ جا اجزاء
| نيوڪليڪ ايسڊ ڇڏڻ وارو ايجنٽ |
| آر اين اي محافظ |
| 2 × RT-qPCR بفر |
| Enzyme مرکب (Taq&M-MLV) |
| هدايتون |
پي سي آر ايپليڪيشن
1. هڪ دفعو PCR ردعمل ٽيوب کي مختصر طور تي سينٽرفيوج ڪيو ويو آهي، انهن کي ايمپليفڪيشن اوزار جي نموني ٽينڪ ۾ رکو.
2. حرارتي پروٽوڪول
| قدم | گرمي پد | وقت | سائيڪلون | |
| 1 | ريورس ٽرانسپشن | 50 ℃ | 15 منٽ | 1 |
| 2 | اڳواٽ ٺهڻ | 95 ℃ | 1 منٽ | 1 |
| 3 | رد ڪرڻ | 95 ℃ | 10 سيڪنڊ | 42 |
| 4 | انيل / واڌ | 60 ℃ | 30 سيڪنڊ | |
نوٽ:فلورسنٽ سگنل هر چڪر جي واڌ جي قدم کان پوء فوري طور تي معلوم ڪيو ويو.
3. سيٽنگ کان پوء، فائل کي محفوظ ڪريو ۽ رد عمل پروگرام کي هلائي.
آپريٽنگ مرحلا
ريجينٽ تيار ڪرڻ کان اڳ، کٽ ۾ موجود سڀني ريجنن کي ڪمري جي حرارت تي پگھلايو وڃي ۽ نرميءَ سان ملايو وڃي.
ريجنٽ تيار ڪرڻ
1. نيوڪليڪ ايسڊ رليز ميڪ تيار ڪريو
| جزو | مقدار في نموني يا ڪنٽرول |
| نيوڪليڪ ايسڊ ڇڏڻ وارو ايجنٽ | 5μL |
| آر اين اي محافظ | 0.5 μL |
2. ري ايڪشن مکس تيار ڪريو
| جزو | مقدار في نموني يا ڪنٽرول |
| 2 × RT-qPCR بفر | 15 μL |
| Enzyme مرکب (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| پرائمري ۽ تحقيق | 1μL |
اسٽوريج ۽ شيلف زندگي
ڪٽ -20 تي ذخيرو ٿيڻ گهرجي± 5℃.صحيح مدت 12 مهينا آهي.
بار بار منجمد ڪرڻ واري چڪر کان پاسو ڪريو (<5 چڪر).
