QuickEasyᴹ Real Time PCR Kit- Taqman
کٽ جي وضاحت:
◮منفرد پي سي آر اصلاحي نظام کي 2 × QuickEasy بڻائي ٿوTMحقيقي پي سي آر ميڪس-تقمان وڌيڪ مطابقت.
◮Hot-Start Foregene HS Taq Polymerase ۾ اعلي ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي، اعلي ايمپليفڪيشن حساسيت، ۽ اعلي ايمپليفڪيشن جي خصوصيت آهي.
◮2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman هڪ منفرد سسٽم استعمال ڪري ٿو جيڪو Foregene پاران ترتيب ڏنل مخصوص جانچ جي حساسيت ۽ خاصيت کي بهتر ڪرڻ لاءِ، جيڪو جينو ٽائپنگ ۽ ڪاپي نمبر جي مختلف قسمن جي تعين لاءِ استعمال ڪري سگهجي ٿو ۽ صحيح نتيجا حاصل ڪري ٿو.
◮هي پراڊڪٽ ROX اندروني ريفرنس ڊائي سان اچي ٿو، جيڪو سگنل جي پس منظر کي ختم ڪرڻ ۽ کوهن جي وچ ۾ سگنل جي غلطي کي ختم ڪرڻ لاءِ استعمال ڪري سگهجي ٿو، جيڪو گراهڪن لاءِ آسان آهي مختلف قسم جي مقداري PCR آلات ۾ استعمال ڪرڻ لاءِ.
وضاحتون
2 × QuickEasyTMQuickEasy پاران مهيا ڪيل حقيقي پي سي آر ميڪس-تقمانTMريئل ٽائم پي سي آر ڪٽ-تقمان کٽ هڪ نئين نسل جو ماسٽر ميڪس سسٽم آهي جيڪو ريئل ٽائيم پي سي آر ايمپليفڪيشن ريڪشن لاءِ ٺهيل آهي مخصوص فلورسنٽ پروبس استعمال ڪندي.ان جو بنيادي Foregene HS Taq DNA Polymerase اينٽي باڊي ترميمي تي ٻڌل آهي، استعمال ڪيو ويو آهي فارگيني وڌيڪ بهتر ڪيل PCR سسٽم سان گڏ، اعليٰ خصوصيت ۽ ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي آهي.عام پي سي آر ميڪس جي مقابلي ۾، ان کي مضبوط وڌائڻ جي صلاحيت ۽ گھٽ بي ميل جي شرح آهي.اهو fluorescence quantitative PCR رد عمل ۾ استعمال ڪري سگهجي ٿو غير مخصوص amplification کي گهٽائڻ ۽ PCR جي درستگي کي بهتر ڪرڻ لاء.اهو تمام گهڻو بهتر ڪري سگهي ٿو پيداوار جي خاصيت ۽ رد عمل جي حساسيت.ساڳئي وقت، ROX هڪ اندروني ريفرنس رنگ جي طور تي مهيا ڪئي وئي هئي.
QuickEasyTMريئل ٽائم پي سي آر ڪٽ-تقمان کٽ ۾ ٽيمپليٽ جي مقدار لاءِ ايپليڪيشن جو وسيع دائرو آهي، ۽ مختلف مقداري علائقن ۾ سٺو معياري وکر حاصل ڪري سگهي ٿو، ۽ سٺي ريپٽيبلٽي ۽ اعليٰ اعتماد سان ٽارگيٽ جين کي درست مقدار ۽ معلوم ڪري سگهي ٿو.
وضاحتون
200 تياريون،500 تياريون،1000 تياريون،2000 تياريون
کٽ جا اجزاء
| QuickEasyTMحقيقي وقت PCR کٽ-تقمان(20μlسسٽم) | ||||
| کٽ جو مواد | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 تياريون | 500 تياريون | 1000 تياريون | 2000 تياريون | |
| 2×جلديآسانTM حقيقي پي سي آر ملائڻ-تقمان | 1 ايم ايل×2 | 1.7 مليل×3 | 1.7 مليل×6 | 1.7 مليل×12 |
| 20×ROX حوالو رنگ | 200μL | 0.5 ايم ايل | 1 ايم ايل | 1 ايم ايل×2 |
| DNase-مفت ddH2O | 1.7 مليل | 1.7 مليل×2 | 10 ملي | 20 ملي |
| آئي ايف يو | 1ٽڪرو | 1ٽڪرو | 1ٽڪرو | 1ٽڪرو |
خاصيتون ۽ فائدا
■ منفرد PCR اصلاحي نظام کي 2×QuickEasy بڻائي ٿوTMحقيقي پي سي آر ميڪس-تقمان وڌيڪ مطابقت.
■ Hot-Start Foregene HS Taq Polymerase وٽ وڌيڪ ايمپليفڪيشن ڪارڪردگي، اعليٰ ايمپليفڪيشن حساسيت، ۽ اعليٰ ايمپليفڪيشن جي خصوصيت آهي.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix-Taqman هڪ منفرد سسٽم استعمال ڪري ٿو جيڪو Foregene پاران ترتيب ڏنل مخصوص جانچ جي حساسيت ۽ خاصيت کي بهتر ڪرڻ لاءِ، جيڪو جينو ٽائپنگ ۽ ڪاپي نمبر جي مختلف قسمن جي تعين لاءِ استعمال ڪري سگهجي ٿو ۽ صحيح نتيجا حاصل ڪري ٿو.
■ هي پراڊڪٽ ROX اندروني ريفرنس ڊائي سان اچي ٿو، جيڪو سگنل جي پس منظر کي ختم ڪرڻ ۽ کوهن جي وچ ۾ سگنل جي غلطي کي ختم ڪرڻ لاءِ استعمال ڪري سگهجي ٿو، جيڪو گراهڪن لاءِ آسان آهي مختلف قسم جي مقداري PCR آلات ۾ استعمال ڪرڻ لاءِ.
ڪٽ ايپليڪيشن
■ fluorescence quantitative PCR ٽيمپليٽ quantitative analysis لاءِ؛
■ سيروايتي PCR amplification؛
■ استعمال ڪري سگھجي ٿو ايليل ڳولڻ لاء.
اسٽوريج ۽ شيلف زندگي
کٽ کي اونداهي ۾ -20 ° سي تي رکڻ گهرجي؛جيڪڏهن اهو اڪثر استعمال ڪيو ويندو آهي، اهو پڻ ذخيرو ٿي سگهي ٿو 4 ° C تي ٿوري وقت لاء (10 ڏينهن اندر استعمال ڪريو).
حقيقي وقت پي سي آر پرائمر ڊيزائن جا اصول
فارورڊ پرائمر ۽ ريورس پرائمر
حقيقي وقت پي سي آر لاء، پرائمر ڊيزائن تمام ضروري آهي.پرائمر PCR amplification جي خاصيت ۽ ڪارڪردگي سان لاڳاپيل آهن، ۽ هيٺ ڏنل اصولن جي حوالي سان ٺهيل ٿي سگهن ٿا:
پرائمر جي ڊيگهه: 18-30bp.
جي سي مواد: 40-60٪.
Tm قدر: پرائمر ڊيزائن سافٽ ويئر، جهڙوڪ پرائمر 5، پرائمر جي Tm قدر ڏئي سگھي ٿو.اپ اسٽريم ۽ لانڊ اسٽريم پرائمر جي Tm قدرن کي جيترو ٿي سگھي ويجھو ٿيڻ گھرجي.Tm حساب ڪتاب جو فارمولا پڻ استعمال ڪري سگھجي ٿو: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).جڏهن پي سي آر کي انجام ڏيو، 5 ° C جي پرائمر Tm قدر کان هيٺ درجه حرارت عام طور تي اينيلنگ جي درجه حرارت جي طور تي چونڊيو ويندو آهي (اينيلنگ جي درجه حرارت ۾ لاڳاپيل اضافو پي سي آر جي رد عمل جي خاصيت کي وڌائي سگھي ٿو).
پرائمر ۽ پي سي آر پروڊڪٽس:
ڊزائين پرائمر پي سي آر ايمپليفڪيشن پراڊڪٽ جي ڊيگهه ترجيحي طور تي 100-150bp آهي.
ٽيمپليٽ جي ثانوي ساخت واري علائقي ۾ ڊيزائن جي پرائمر کي ممڪن حد کان بچڻ گهرجي.
اپ اسٽريم ۽ ڊائون اسٽريم پرائمر جي 3′ سرن جي وچ ۾ 2 يا وڌيڪ مڪمل ڪندڙ بنيادن جي ٺهڻ کان پاسو ڪريو.
پرائمر 3′ ٽرمينل بيس موجود نه ٿو ٿي سگھي 3 اضافي لڳاتار G يا C سان.
پرائمر پاڻ کي مڪمل ڍانچي نه ٿا ڪري سگھن، ٻي صورت ۾ هڪ بال جي پنن جي جوڙجڪ ٺاهي ويندي، PCR امپليفڪيشن کي متاثر ڪندي.
ATCG کي پرائمر جي ترتيب ۾ جيترو ممڪن طور تي ورهايو وڃي، ۽ 3′ ٽرمينل بيس کي T کان بچڻ گهرجي.
ضميمو 1: سيل سڌو RT-qPCR کٽ جزو اضافي پيڪ
1.سيل ليسس حل
|
| |||
| کٽ جا اجزاء (24-سٺو lysis نظام / چڱي طرح) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 ٽي | 500 ٽي | ||
| حصواي | بفر CL | 20 مليل | 100 مليل |
| Foregene Protease پلس II | 400 μl | 1 ملي × 2 | |
| بفر ايس ٽي | 1 ملي × 2 | 10 مليل | |
| حصوII | ڊي اين اي ريزر | 400 μl | 1 ملي × 2 |
2.RT مکس
|
| |
| کٽ جا اجزاء (20 μl ردعمل سسٽم) | DRT-01011-B1 |
| 200 ٽي | |
| 5 × سڌو RT ميڪس | 800 μl |
| RNase-مفت ddH2O | 1.7 ملي × 2 |
|
| ||
| کٽ جا اجزاء (20 μl ردعمل سسٽم) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 ٽي | 1000 ٽي | |
| 2 × سڌو qPCR ميڪس-SYBR | 1 ملي × 2 | 1.7 ملي × 6 |
| 50 × ROX حوالو رنگ | 40 μl | 200 μl |
| RNase-مفت ddH2O | 1.7 مليل | 10 مليل |
