پلانٽ ڊي اين اي آئسوليشن کٽ جينومڪ پلانٽ ڊي اين اي پيوريفڪيشن ڪٽس ريجنٽس پروٽوڪول
وضاحتون
50 تياريون، 100 تياريون، 250 تياريون
هي ڪٽ هڪ ڊي اين اي صرف ڪالم استعمال ڪري ٿو جيڪو خاص طور تي ڊي اين اي، فارگين پروٽيز ۽ هڪ منفرد بفر سسٽم کي پابند ڪري سگهي ٿو، جيڪو پلانٽ جينومڪ ڊي اين اي جي صفائي کي تمام آسان بڻائي ٿو.اعليٰ معيار جي جينومڪ ڊي اين اي 30 منٽن اندر حاصل ڪري سگهجي ٿو، جيڪو جينومڪ ڊي اين اي جي تباهي کان بچي ٿو.
اسپين ڪالمن ۾ استعمال ٿيندڙ ڊي اين اي صرف سليڪا جيل جھلي فارگين جو منفرد نئون مواد آهي، جيڪو اثرائتو ۽ خاص طور تي ڊي اين اي سان جڙي سگھي ٿو، ۽ آر اين اي، ناپاڪ پروٽين، آئنز، پولي سيڪرائڊس، پوليفينول ۽ ٻين نامياتي مرکبات کي ختم ڪري سگھي ٿو.
پيداوار جا اجزاء
| بفر PL1، بفر PL2 |
| بفر PW، بفر WB، بفر EB |
| فاريني پروٽيز |
| ڊي اين اي صرف ڪالمن |
| هدايتون |
خاصيتون ۽ فائدا
■ ڪو RNase آلودگي ناهي: کٽ پاران مهيا ڪيل ڊي اين اي-فقط ڪالم اهو ممڪن بڻائي ٿو ته آر اين اي کي جينومڪ ڊي اين اي مان هٽايو وڃي بغير ڪنهن اضافي RNase جي، ليبارٽري کي خارجي RNase ذريعي آلودگي کان روڪيو.
■ تيز رفتار: Foregene Protease هڪجهڙائي واري پروٽيز کان وڌيڪ سرگرمي رکي ٿي ۽ ٽشو جي نمونن کي تيزيءَ سان هضم ڪري ٿي.
■ سادو: جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ وارو آپريشن 30 منٽن ۾ مڪمل ٿي سگھي ٿو.
■ آسان: سينٽرفيوگريشن ڪمري جي گرمي پد تي ڪئي ويندي آهي، 4 ℃ گھٽ درجه حرارت سينٽرفيوگريشن يا ڊي اين اي جي ايٿانول ورن جي ضرورت ناهي.
■ حفاظت: ڪا به نامياتي ريجنٽ گهربل ناهي.
■ اعليٰ معيار: صاف ٿيل جينومڪ ڊي اين اي ۾ وڏا ٽڪرا آهن، نه RNA، نه RNase، ۽ انتهائي گهٽ آئن مواد، مختلف تجربن جون گهرجون پوريون ڪري سگهن ٿا.
ڪٽ ايپليڪيشن
تازو يا منجمد ٻوٽن جي بافتن مان جينومڪ ڊي اين اي کي ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ مناسب.
ڪم جي وهڪري
خاڪو
اسٽوريج ۽ شيلف زندگي
کٽ کي 12 مهينن تائين ڪمري جي گرمي پد (15–25 ℃) ۽ 2–8 ℃ تي گهڻي وقت تائين محفوظ ڪري سگهجي ٿو.
Foregene Protease Plus حل هڪ منفرد فارمولا آهي، جيڪو فعال هوندو آهي جڏهن ڪمري جي حرارت تي ڊگهي وقت تائين محفوظ ڪيو وڃي (3 مهينا)؛ان جي سرگرمي ۽ استحڪام بهتر ٿي ويندي جڏهن محفوظ ڪيو وڃي4 ℃، تنهنڪري ان کي 4 ℃ تي ذخيرو ڪرڻ جي صلاح ڏني وئي آهي، ياد رکڻ لاء -20 ℃ تي ذخيرو نه ڪريو.
مسئلن جي تجزيي جي ھدايت
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.
گھٽ پيداوار يا ڪو ڊي اين
عام طور تي ڪيترائي عنصر آھن جيڪي جينومڪ ڊي اين اي جي پيداوار کي متاثر ڪن ٿا، جن ۾ نموني جو ذريعو، نموني جي عمر، نموني جي اسٽوريج حالتون، ۽ آپريشن شامل آھن.
جينوميڪ ڊي اين اي حاصل نه ٿي سگهيو آهي ڪڍڻ دوران
1. ٽشو جا نمونا غلط طريقي سان محفوظ ڪيا وڃن ٿا يا تمام گهڻي عرصي تائين محفوظ ڪيا وڃن ٿا، جنهن جي نتيجي ۾ جينومڪ ڊي اين اي جي تباهي اچي ٿي.
سفارش: ذخيرو ٽشو نموني مائع نائٽروجن يا -20 ۾°ج؛جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ لاءِ نوان گڏ ڪيل نمونا استعمال ڪرڻ جي ڪوشش ڪريو.
2. نموني جي تمام گھٽ مقدار شايد لاڳاپيل جينومڪ ڊي اين اي کي نه ڪڍيو وڃي.
تجويز: ٽشو جي نمونن لاءِ جيڪي ڊگھي عرصي کان محفوظ ڪيا ويا آھن يا جن ۾ جينومڪ ڊي اين اي جي سخت خرابي آھي، ٽشو جي نمونن جي مقدار کي مناسب طور تي وڌائي سگھجي ٿو ته جيئن ڪافي جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ لاءِ.نموني جي مقدار کي ڊي اين اي جي ضرورتن مطابق طئي ڪري سگهجي ٿو، پر تازو نمونو 100mg کان وڌيڪ نه هجڻ گهرجي، ۽ خشڪ نموني 30mg کان وڌيڪ نه هجڻ گهرجي.
3. نمونو مائع نائيٽروجن سان گڏ نه آهي يا مائع نائيٽروجن کان پوء گهڻو وقت تائين رکيل ناهي.
تجويز: ڊي اين اي ڪڍڻ دوران، سيل جي ڀت کي ٽوڙڻ لاء نموني کي مائع نائٽروجن سان مڪمل طور تي گرائونڊ ڪرڻ جي ضرورت آهي.پيس ڪرڻ کان پوء، مهرباني ڪري نموني پائوڊر کي PL1 تي منتقل ڪريو 65 تي اڳ گرم°سي جيترو جلدي ٿي سگهي (هڪ ڀيرو زمين جو پائوڊر ڳري ويندو، جينومڪ ڊي اين اي تيزيءَ سان خراب ٿيڻ شروع ٿي ويندو).
4. Foregene Protease جي غلط ذخيري جي نتيجي ۾ سرگرمي گھٽجي يا غير فعال ٿي وڃي ٿي.
سفارش: Foregene Protease جي اسٽوريج جي حالتن جي تصديق ڪريو يا ان کي اينزيميٽڪ هائڊروليسس لاءِ نئين فاريني پروٽيز سان تبديل ڪريو.
5. ڪٽ غلط طور تي ذخيرو ٿيل آهي يا تمام گهڻي عرصي تائين ذخيرو ٿيل آهي، جنهن ڪري کٽ ۾ ڪجهه اجزاء ناڪام ٿي ويا آهن.
تجويز: لاڳاپيل عملن لاءِ نئين ٻوٽي جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ واري کٽ خريد ڪريو.
6. کٽ جو غلط استعمال.
تجويز: ٻوٽن جي ڊي اين اي آئسوليشن کٽ خريد ڪريو جيڪو ٻوٽن جي جينومڪ ڊي اين اي کي ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ نمونن لاءِ وقف ڪيو ويو آهي.
7. بفر WB بغير شامل ڪرڻ جيناريل ايٿانول.
سفارش: بفر WB ۾ مطلق ايٿانول جي صحيح مقدار کي شامل ڪرڻ جي پڪ ڪريو.
8. ايليوئنٽ کي سليڪا جھلي تي صحيح طرح نه ڇڏيو ويو.
صلاح: 65 تي اڳ ۾ گرم ٿيل ايليونٽ شامل ڪريو℃سليڪا جيل جھلي جي وچ واري پاسي کي ڇڏي ڏيو، ۽ ان کي ڪمري جي حرارت تي 5 منٽن لاء ڇڏي ڏيو ته جيئن ايليوشن ڪارڪردگي کي وڌايو وڃي.
گھٽ-پيداوار جينومڪ ڊي اين اي حاصل ڪرڻ لاء ڪڍڻ
1. نمونو غلط طور تي ذخيرو ٿيل آهي يا تمام گهڻي عرصي تائين ذخيرو ٿيل آهي، جنهن جي نتيجي ۾ جينومڪ ڊي اين اي جي تباهي ٿي.
سفارش: ذخيرو ٽشو نموني -20 تي℃؛جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ لاءِ نوان گڏ ڪيل ٽشو جا نمونا استعمال ڪرڻ جي ڪوشش ڪريو.
2. جيڪڏهن ٽشو نموني جو مقدار تمام ننڍڙو آهي، ڪڍيل جينوميڪ ڊي اين اي گهٽ ٿيندو.
تجويز: ڪجهه ٻوٽن جا نمونا پاڻيءَ سان ڀرپور هوندا آهن، جهڙوڪ آبي ٻوٽا جهڙوڪ الگا وغيره، ان جي مقدار کي مناسب طور تي وڌائي سگهجي ٿو يا آپريشن کان ٿورو اڳ پاڻي کي خارج ڪري سگهجي ٿو.
3. نمونن کي مائع نائيٽروجن سان چڱيءَ طرح پسايو نه ويو يا پيسڻ کان پوءِ ڪمري جي گرمي پد تي گهڻو وقت ڇڏي ويو.
تجويز: مائع نائيٽروجن پيسڻ ڪافي هجڻ گهرجي، ۽ نموني سيل جي ڀت کي ممڪن طور تي ٽوڙڻ گهرجي.فوري طور تي پيس ڪرڻ کان پوء، نموني پائوڊر کي 65 ڏانهن منتقل ڪيو وڃي℃اڳيون گرم ٿيل بفر PL1 ايندڙ قدم لاءِ.
4. صحيح کٽ استعمال نه ڪرڻ.
سفارش: ٻوٽن جي جينومڪ ڊي اين اي کي ڪڍڻ ۽ صاف ڪرڻ لاءِ هڪ وقف ٿيل پلانٽ ڊي اين اي آئسوليشن کٽ استعمال ڪريو.
5. Foregene Protease جي غلط ذخيري جي نتيجي ۾ سرگرمي گھٽجي ٿي يا غير فعال ٿي وڃي ٿي.
سفارش: Foregene Protease جي اسٽوريج جي حالتن جي تصديق ڪريو يا ان کي اينزيميٽڪ هائڊروليسس لاءِ نئين فاريني پروٽيز سان تبديل ڪريو.
6. Eluent مسئلو
سفارش: مھرباني ڪري استعمال ڪريو بفر اي بي ايلشن لاء؛جيڪڏهن ddH استعمال ڪري رهيا آهيو2اي يا ٻيا ايليوئنٽس، پڪ ڪريو ته ايليوئنٽ جو پي ايڇ 7.0-8.5 جي وچ ۾ آهي.
7. ايليوئنٽ صحيح طور تي نه اڇلايو ويو آهي
صلاح: مھرباني ڪري سليڪا جھلي جي وچ ۾ ايليوشن ڊراپ شامل ڪريو ۽ ان کي ڪمري جي حرارت تي 5 منٽن لاءِ ڇڏي ڏيو ته جيئن ايليوشن ڪارڪردگي کي وڌايو وڃي.
8. ايليوئنٽ حجم تمام ننڍو آهي
صلاح: مھرباني ڪري جينومڪ ڊي اين اي ايليوشن لاءِ ايليوئنٽ استعمال ڪريو ھدايتن موجب، گھٽ ۾ گھٽ 100 کان گھٽ نهμl.
جينومڪ ڊي اين اي کي گھٽ پاڪائي سان ڪڍيو ويو
جينومڪ ڊي اين اي جي گھٽتائي، هيٺئين دڙي جي تجربن جي ناڪامي يا خراب اثر جو سبب بڻجندي، جيئن ته: انزائيم کي ڪٽي نه ٿو سگهجي، ۽ ٽارگيٽ جين جو ٽڪرو PCR ذريعي حاصل نٿو ڪري سگهجي.
1. متفرق پروٽين جي آلودگي، آر اين اي آلودگي.
تجزيو: بفر PW ڪالمن کي ڌوئڻ لاء استعمال نه ڪيو ويو؛بفر PW صحيح سينٽرفيوگريشن جي رفتار تي ڪالمن کي ڌوئڻ لاءِ استعمال نه ڪيو ويو.
صلاح: پڪ ڪرڻ جي ڪوشش ڪريو ته سپرنيٽنٽ ۾ ڪو به ورن نه هجي جڏهن سپرنيٽنٽ ڪالمن مان گذري وڃي.هدايتن جي مطابق بفر PW سان صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ڌوئڻ جي پڪ ڪريو، ۽ هن قدم کي ختم نٿو ڪري سگهجي.
2. Impurity آئن آلودگي.
تجزيو: بفر WB واش ڪالمن کي ختم ڪيو ويو يا صرف هڪ ڀيرو ڌوئي ويو، نتيجي ۾ بقايا آئنڪ آلودگي جي نتيجي ۾.
سفارش: بفر WB سان ٻه ڀيرا ڌوئڻ جي هدايتن جي مطابق باقي آئنز کي جيترو ممڪن ٿي سگھي ختم ڪرڻ جي پڪ ڪريو.
3. RNase آلودگي.
تجزيو: Exogenous RNase بفر ۾ شامل ڪيو ويو آهي؛Buffer PW ۾ غلط واشنگ آپريشن جي نتيجي ۾ بقايا RNase ٿيندو ۽ ھيٺئين دڙي واري RNA تجرباتي عملن کي متاثر ڪندو، جهڙوڪ ويٽرو ٽرانسپشن ۾.
تجويز: Foregene سيريز نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ واري ڪِٽس اضافي RNase کان سواءِ RNA کي ختم ڪري سگھن ٿيون، ۽ پلانٽ DNA Isolation Kit ۾ موجود سمورن Reagents کي RNase جي ضرورت ناهي.هدايتن جي مطابق بفر PW سان صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ڌوئڻ جي پڪ ڪريو، ۽ هن قدم کي ختم نٿو ڪري سگهجي.
4. Ethanol residues.
تجزيو: صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي بفر WB سان ڌوئڻ کان پوء، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن نه ڪئي وئي.
سفارش: مناسب خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن لاءِ هدايتن تي عمل ڪريو.
ھدايت وارو دستور:
پلانٽ ڊي اين اي آئسوليشن ڪٽ جي هدايت نامو
