چين ٺاهيندڙ 2× ڪنسنٽريڊ پريمڪس لاءِ غير صاف ٿيل نمونو حقيقي وقت مقداري PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
تنظيم طريقيڪار جي تصور تي قائم رهي ٿي ”سائنسي انتظام، اعليٰ معيار ۽ ڪارڪردگيءَ جي اوليت، خريدار اعليٰ چين ٺاهيندڙ لاءِ 2× ڪنسنٽريڊ پريمڪس لاءِ غير صاف ٿيل نموني حقيقي وقت مقداري پي سي آر Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U، اسان جو ڪاروبار گراهڪ کي ڏيڻ لاءِ وقف آهي اسان جي هر صارف کي اهم ۽ محفوظ اعليٰ معيار جي پروڊڪٽس سان گڏ اهم ۽ محفوظ اعليٰ معيار جي پروڊڪٽس ٺاهڻ لاءِ.
تنظيم "سائنسي انتظام، اعلي معيار ۽ ڪارڪردگي جي ترجيح، خريد ڪندڙ لاء اعلي معيار" جي طريقيڪار جي تصور تي رکندو آهي.چين تاڪ ڊي اين اي پوليميرس ۽ Qpcr، اسان جي ڪمپني کي ڪافي طاقت آهي ۽ هڪ مستحڪم ۽ ڀرپور سيلز نيٽ ورڪ سسٽم آهي.اسان چاهيون ٿا ته اسان باهمي فائدن جي بنياد تي گهر ۾ ۽ ٻاهرين سڀني گراهڪن سان سٺي ڪاروباري تعلقات قائم ڪري سگهون.
حقيقي وقت پي سي آر پرائمر ڊيزائن جا اصول
فارورڊ پرائمر ۽ ريورس پرائمر
حقيقي وقت پي سي آر لاء، پرائمر ڊيزائن تمام ضروري آهي.پرائمر PCR amplification جي خاصيت ۽ ڪارڪردگي سان لاڳاپيل آهن، ۽ هيٺ ڏنل اصولن جي حوالي سان ٺهيل ٿي سگهن ٿا:
- پرائمر جي ڊيگهه: 18-30bp.
- جي سي مواد: 40-60٪.
- Tm قدر: پرائمر ڊيزائن سافٽ ويئر، جهڙوڪ پرائمر 5، پرائمر جي Tm قدر ڏئي سگھي ٿو.اپ اسٽريم ۽ لانڊ اسٽريم پرائمر جي Tm قدرن کي جيترو ٿي سگھي ويجھو ٿيڻ گھرجي.Tm حساب ڪتاب جو فارمولا پڻ استعمال ڪري سگھجي ٿو: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).جڏهن پي سي آر کي انجام ڏيو، 5 ° C جي پرائمر Tm قدر کان هيٺ درجه حرارت عام طور تي اينيلنگ جي درجه حرارت جي طور تي چونڊيو ويندو آهي (اينيلنگ جي درجه حرارت ۾ لاڳاپيل اضافو پي سي آر جي رد عمل جي خاصيت کي وڌائي سگھي ٿو).
- پرائمر ۽ پي سي آر پروڊڪٽس:
- ڊزائين پرائمر پي سي آر ايمپليفڪيشن پراڊڪٽ جي ڊيگهه ترجيحي طور تي 100-150bp آهي.
- ٽيمپليٽ جي ثانوي ساخت واري علائقي ۾ ڊيزائن جي پرائمر کي ممڪن حد کان بچڻ گهرجي.
- اپ اسٽريم ۽ ڊائون اسٽريم پرائمر جي 3′ سرن جي وچ ۾ 2 يا وڌيڪ مڪمل ڪندڙ بنيادن جي ٺهڻ کان پاسو ڪريو.
- پرائمر 3′ ٽرمينل بيس موجود نه ٿو ٿي سگھي 3 اضافي لڳاتار G يا C سان.
- پرائمر پاڻ کي مڪمل ڍانچي نه ٿا ڪري سگھن، ٻي صورت ۾ هڪ بال جي پنن جي جوڙجڪ ٺاهي ويندي، PCR امپليفڪيشن کي متاثر ڪندي.
- ATCG کي پرائمر جي ترتيب ۾ جيترو ممڪن طور تي ورهايو وڃي، ۽ 3′ ٽرمينل بيس کي T کان بچڻ گهرجي.
ضميمو1: سيايل سڌوRT-qPCR کٽ جو جزوt اضافي پيڪيج
1. سيل ليسس حل
| سيل ليسس حل | |||
| کٽ جا اجزاء (24-سٺو lysis نظام / چڱي طرح) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 ٽي | 500 ٽي | ||
| حصواي | بفر CL | 20 مليل | 100 مليل |
| Foregene Protease پلس II | 400 μl | 1 ملي × 2 | |
| بفر ايس ٽي | 1 ملي × 2 | 10 مليل | |
| حصوII | ڊي اين اي ريزر | 400 μl | 1 ملي × 2 |
| RT مکس | |
| کٽ جا اجزاء (20 μl ردعمل سسٽم) | DRT-01011-B1 |
| 200 ٽي | |
| 5 × سڌو RT ميڪس | 800 μl |
| RNase-مفت ddH2O | 1.7 ملي × 2 |
| qPCR مکس | ||
| کٽ جا اجزاء (20 μl ردعمل سسٽم) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200 ٽي | 1000 ٽي | |
| 2 × سڌو qPCR ميڪس-تقمان | 1 ملي × 2 | 1.7 ملي × 6 |
| 20 × ROX حوالو رنگ | 40 μl | 200 μl |
| RNase-مفت ddH2O | 1.7 مليل | 10 مليل |
تنظيم طريقيڪار جي تصور تي قائم رهي ٿي ”سائنسي انتظام، اعليٰ معيار ۽ ڪارڪردگيءَ جي اوليت، خريدار اعليٰ چين ٺاهيندڙ لاءِ 2× ڪنسنٽريڊ پريمڪس لاءِ غير صاف ٿيل نموني حقيقي وقت مقداري پي سي آر Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U، اسان جو ڪاروبار گراهڪ کي ڏيڻ لاءِ وقف آهي اسان جي هر صارف کي اهم ۽ محفوظ اعليٰ معيار جي پروڊڪٽس سان گڏ اهم ۽ محفوظ اعليٰ معيار جي پروڊڪٽس ٺاهڻ لاءِ.
چين جي ڪاريگر لاءچين تاڪ ڊي اين اي پوليميرس ۽ Qpcr، اسان جي ڪمپني کي ڪافي طاقت آهي ۽ هڪ مستحڪم ۽ ڀرپور سيلز نيٽ ورڪ سسٽم آهي.اسان چاهيون ٿا ته اسان باهمي فائدن جي بنياد تي گهر ۾ ۽ ٻاهرين سڀني گراهڪن سان سٺي ڪاروباري تعلقات قائم ڪري سگهون.
حقيقي وقت پي سي آر پرائمر ڊيزائن جا اصول
فارورڊ پرائمر ۽ ريورس پرائمر
حقيقي وقت پي سي آر لاء، پرائمر ڊيزائن تمام ضروري آهي.پرائمر PCR amplification جي خاصيت ۽ ڪارڪردگي سان لاڳاپيل آهن، ۽ هيٺ ڏنل اصولن جي حوالي سان ٺهيل ٿي سگهن ٿا:
- پرائمر جي ڊيگهه: 18-30bp.
- جي سي مواد: 40-60٪.
- Tm قدر: پرائمر ڊيزائن سافٽ ويئر، جهڙوڪ پرائمر 5، پرائمر جي Tm قدر ڏئي سگھي ٿو.اپ اسٽريم ۽ لانڊ اسٽريم پرائمر جي Tm قدرن کي جيترو ٿي سگھي ويجھو ٿيڻ گھرجي.Tm حساب ڪتاب جو فارمولا پڻ استعمال ڪري سگھجي ٿو: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).جڏهن پي سي آر کي انجام ڏيو، 5 ° C جي پرائمر Tm قدر کان هيٺ درجه حرارت عام طور تي اينيلنگ جي درجه حرارت جي طور تي چونڊيو ويندو آهي (اينيلنگ جي درجه حرارت ۾ لاڳاپيل اضافو پي سي آر جي رد عمل جي خاصيت کي وڌائي سگھي ٿو).
- پرائمر ۽ پي سي آر پروڊڪٽس:
- ڊزائين پرائمر پي سي آر ايمپليفڪيشن پراڊڪٽ جي ڊيگهه ترجيحي طور تي 100-150bp آهي.
- ٽيمپليٽ جي ثانوي ساخت واري علائقي ۾ ڊيزائن جي پرائمر کي ممڪن حد کان بچڻ گهرجي.
- اپ اسٽريم ۽ ڊائون اسٽريم پرائمر جي 3′ سرن جي وچ ۾ 2 يا وڌيڪ مڪمل ڪندڙ بنيادن جي ٺهڻ کان پاسو ڪريو.
- پرائمر 3′ ٽرمينل بيس موجود نه ٿو ٿي سگھي 3 اضافي لڳاتار G يا C سان.
- پرائمر پاڻ کي مڪمل ڍانچي نه ٿا ڪري سگھن، ٻي صورت ۾ هڪ بال جي پنن جي جوڙجڪ ٺاهي ويندي، PCR امپليفڪيشن کي متاثر ڪندي.
- ATCG کي پرائمر جي ترتيب ۾ جيترو ممڪن طور تي ورهايو وڃي، ۽ 3′ ٽرمينل بيس کي T کان بچڻ گهرجي.
ضميمو1: سيايل سڌوRT-qPCR کٽ جو جزوt اضافي پيڪيج
1. سيل ليسس حل
| سيل ليسس حل | |||
| کٽ جا اجزاء (24-سٺو lysis نظام / چڱي طرح) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 ٽي | 500 ٽي | ||
| حصواي | بفر CL | 20 مليل | 100 مليل |
| Foregene Protease پلس II | 400 μl | 1 ملي × 2 | |
| بفر ايس ٽي | 1 ملي × 2 | 10 مليل | |
| حصوII | ڊي اين اي ريزر | 400 μl | 1 ملي × 2 |
| RT مکس | |
| کٽ جا اجزاء (20 μl ردعمل سسٽم) | DRT-01011-B1 |
| 200 ٽي | |
| 5 × سڌو RT ميڪس | 800 μl |
| RNase-مفت ddH2O | 1.7 ملي × 2 |
| qPCR مکس | ||
| کٽ جا اجزاء (20 μl ردعمل سسٽم) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
| 200 ٽي | 1000 ٽي | |
| 2 × سڌو qPCR ميڪس-تقمان | 1 ملي × 2 | 1.7 ملي × 6 |
| 20 × ROX حوالو رنگ | 40 μl | 200 μl |
| RNase-مفت ddH2O | 1.7 مليل | 10 مليل |
هدايتون:
