پي سي آر مشين|ڇا توهان واقعي سمجهي رهيا آهيو؟

نوبل انعام ماڻيندڙ PCR ٽيڪنالاجي

1993ع ۾ آمريڪي سائنسدان موليس کي ڪيمسٽري ۾ نوبل انعام مليو ۽ سندس ڪاميابي PCR ٽيڪنالاجي جي ايجاد هئي.PCR ٽيڪنالاجي جو جادو هيٺ ڏنل خاصيتن ۾ آهي: پهرين، ڊي اين اي جي مقدار کي وڌائڻ لاء تمام ننڍڙو آهي، ۽ نظرياتي طور تي هڪ ماليڪيول کي وڌائڻ لاء استعمال ڪري سگهجي ٿو.ٻيو، وڌائڻ جي ڪارڪردگي اعلي آهي، ۽ ٽارگيٽ جين جو مقدار انتهائي آهي.Amplification، چند ڪلاڪن ۾ 10 ملين کان وڌيڪ ڀيرا.هاڻي PCR اوزار وڏي پيماني تي استعمال ڪيو ويو آهي حياتياتي سائنس جي تحقيق ۽ ٻين ڪيترن ئي حصن ۾.

مختلف ماڊلز ۽ تھرمل سائيڪلن جا ٺاھيندڙ شايد مختلف ڪارڪردگي ۽ ورجائي قابليت ڏيکاري سگھن ٿا.اهي فرق نه رڳو پي سي آر جي ڪارڪردگي کي متاثر ڪن ٿا پر حاصل ڪيل ڊيٽا جي درستگي ۽ استحڪام تي پڻ.پي سي آر مشين جي خاصيتن کي سمجهڻ اسان جي تجربن جي ڪاميابي کي وڌائڻ ۾ مدد ڪري سگھن ٿا.

حرارتي ماڊل

پي سي آر جي ڪاميابي يا ناڪامي لاءِ ٿرمل سائيڪلر جي گرمي پد جي درستگي فيصلو ڪري سگهجي ٿي.قابل اعتماد ۽ ٻيهر پيدا ٿيندڙ پي سي آر جا نتيجا حاصل ڪرڻ لاءِ حرارتي بلاڪ تي چڱيءَ طرح سان درجه حرارت جي مطابقت پڻ اهم آهي.

حرارتي درستگي کي يقيني بڻائڻ جو هڪ طريقو اهو آهي ته بار بار ٽيسٽ ڪيو وڃي درجه حرارت جي تصديق واري ڪِٽس کي استعمال ڪيو وڃي ۽ ضرورت مطابق هڪ تربيت يافته پروفيشنل طرفان ٻيهر ترتيب ڏيو.درجه حرارت جي تصديق جا امتحان عام طور تي استعمال ڪيا ويندا آهن:

isothermal موڊ ۾ درجه حرارت کي سيٽ ڪرڻ لاءِ چڱيءَ طرح جي درستگي

گرميءَ جي تبديليءَ کان پوءِ درجه حرارت مقرر ڪرڻ لاءِ چڱيءَ طرح جي درستگي

گرمي پد جي گرمي پد جي درستگي

پرائمر اينيلنگ درجه حرارت ڪنٽرول

تدريسي درجه حرارت ڪنٽرول PCR اوزار جو هڪ فنڪشن آهي جيڪو PCR ۾ پرائمر اينيلنگ جي اصلاح کي آسان بڻائي ٿو.گريڊيئنٽ سيٽنگ جو مقصد ماڊلز جي وچ ۾ مختلف درجه حرارت حاصل ڪرڻ آهي، ۽ هر ڪالمن جي وچ ۾ ≥2 °C جي گرمي پد جي اڀار ۽ زوال جي ڪري، مختلف درجه حرارت کي هڪ ئي وقت جانچي سگهجي ٿو ته جيئن بهتر پرائمر اينيلنگ گرمي پد حاصل ڪري سگهجي.نظرياتي طور تي، هڪ سچي گريجوئيٽ ماڊلز جي وچ ۾ لڪير جي درجه حرارت حاصل ڪري ٿو.

بهرحال، روايتي گريڊيئيٽ تھرمل سائيڪلر عام طور تي ھڪڙي حرارتي بلاڪ کي استعمال ڪن ٿا ۽ گرمي پد کي ڪنٽرول ڪن ٿا ۽ ٻنھي سرن تي واقع ٻن حرارتي ۽ کولنگ عناصر ذريعي، اڪثر ڪري ھيٺين حدن جي نتيجي ۾:

صرف ٻه درجه حرارت مقرر ڪري سگھجن ٿيون: پرائمر اينيلنگ لاءِ اعلي ۽ گھٽ درجه حرارت حرارتي ماڊل جي ٻنهي سرن تي مقرر ٿيل آهن، ۽ ماڊل جي وچ ۾ ٻين درجه حرارت جي درست سيٽنگ حاصل نه ٿي ڪري سگھجي.

مختلف ڪالمن جي وچ ۾ گرمي جي مٽاسٽا جي ڪري، ماڊل تي مختلف علائقن جي وچ ۾ گرمي پد هڪ حقيقي لڪير گريجوئيٽ جي بجاء هڪ sigmoidal وکر جي پيروي ڪرڻ جو امڪان آهي.

نموني گرمي پد

پي سي آر جي نتيجن جي درستگي لاءِ نموني جي درجه حرارت کي ڪنٽرول ڪرڻ لاءِ تھرمل سائيڪلر جي صلاحيت تمام ضروري آھي.اوزار-مخصوص پيٽرول جهڙوڪ ريمپ جي شرح، هولڊ ٽائيم، ۽ الگورتھم نموني جي درجه حرارت جي اڳڪٿي ڪرڻ لاء اهم آهن.

PCR مشين جي گرمي ۽ کولنگ جي شرح جو مطلب آهي ته گرمي پد جي PCR مرحلن جي وچ ۾ تبديليون جيڪي هڪ خاص وقت تي ٿينديون آهن.جيئن ته گرمي کي ماڊل کان نموني ڏانهن منتقل ڪرڻ لاء هڪ خاص وقت لڳندو آهي، نموني جي حقيقي گرمي ۽ ٿڌي جي شرح سست هوندي.تنهن ڪري، درجه حرارت جي تبديلي جي رفتار جي تعريف کي فرق ۽ سمجھڻ جي ضرورت آهي.

وڌ ۾ وڌ يا چوٽي ماڊل ريمپ جي شرح تيز ترين درجه حرارت جي تبديلي جي نمائندگي ڪري ٿي جيڪا ماڊل ريمپ دوران تمام ٿوري عرصي دوران حاصل ڪري سگھي ٿي.

سراسري بلاڪ ريمپ جي شرح گھڻي عرصي دوران درجه حرارت جي تبديلي جي شرح جي نمائندگي ڪري ٿي ۽ پي سي آر مشين جي رفتار جي وڌيڪ نمائندي ماپ مهيا ڪندي.

وڌ ۾ وڌ نموني حرارتي ۽ کولنگ جي شرح ۽ سراسري نموني حرارتي ۽ کولنگ جي شرح نموني پاران حاصل ڪيل حقيقي درجه حرارت کي ظاهر ڪري ٿو.نموني جي گرمي ۽ کولنگ جي شرح پي سي آر مشين جي ڪارڪردگي ۽ پي سي آر جي نتيجن تي ان جي امڪاني اثر جو وڌيڪ صحيح مقابلو مهيا ڪندي.

جڏهن سائيڪل جي متبادل کي انجام ڏيو، اهو سفارش ڪئي وئي آهي ته هڪ اوزار استعمال ڪرڻ لاء ريمپ ريٽ پروگرام سان جيڪو اڳئين موڊ کي آسان بڻائي ٿو ۽ PCR جي ورجائي قابليت تي گهٽ ۾ گهٽ اثر.

حرارتي سائيڪل کي وقت جي مرحلن تي ٺهيل هجڻ گهرجي صرف نموني جي مقرر ڪيل درجه حرارت تي پهچي وڃي.هن طريقي سان، وقت جو نمونو مقرر ڪيل درجه حرارت تي برقرار رکيو ويندو، وڌيڪ صحيح طور تي برقرار رکيو ويندو ساڳئي چڪر جي حالتن سان آپريٽنگ طريقيڪار ۾ گهربل.

حرارتي سائيڪل وارا اڪثر ڪري پيچيده رياضياتي الگورتھم استعمال ڪندا آهن انهي کي يقيني بڻائڻ لاءِ ته نمونا جلدي هڪ مقرر ڪيل پروگرام جي مطابق مقرر ڪيل درجه حرارت تي پهچي سگهن ٿا.رد عمل واري نظام جي مقدار ۽ استعمال ٿيل PCR پلاسٽڪ جي ٿلهي جي بنياد تي، الگورٿم نموني جي درجه حرارت جي اڳڪٿي ڪري سگهي ٿو ۽ مقرر ڪيل درجه حرارت تي پهچڻ ۾ وقت لڳندو.انهن الگورتھم تي ڀروسو ڪندي، حرارتي سائيڪل جي گرم ڪرڻ يا کولڻ واري عمل دوران، بلاڪ جي درجه حرارت عام طور تي مقرر ڪيل قيمت کان وڌي ويندي هڪ پروسيس ذريعي جنهن کي تھرمل بلاڪ اوور شوٽ يا انڊر شوٽ سڏيو ويندو آهي.اهڙي سيٽ اپ کي يقيني بڻائي ٿي ته نمونو سيٽ جي درجه حرارت تي پهچي وڃي جيترو جلدي ممڪن ٿي سگهي بغير ڪنهن کي ختم ڪرڻ يا ان کي ختم ڪرڻ کان سواء.

تجرباتي ذريعي

فيڪٽرز جيڪي تھرمل سائيڪل جي ذريعي وڌائي سگھن ٿا، ريمپ جي شرح، تھرمل بلاڪ ترتيبن، ۽ خودڪار پليٽ فارمن جي انضمام شامل آھن.

حرارتي سائيڪل جي گرمي ۽ کولنگ جي شرح انهي رفتار جي نمائندگي ڪري ٿي جنهن تي اهو مقرر ڪيل درجه حرارت تي پهچي ٿو.جيترو تيزيءَ سان گرمي پد ۾ اضافو ۽ زوال ٿيندو، اوترو تيز PCR هلندو، جنهن جو مطلب آهي ته وڌيڪ تجربا مقرر وقت ۾ مڪمل ڪري سگهجن ٿا.ان کان سواء، تجربن کي تيز ڪري سگھجي ٿو تيز ڊي اين اي پوليميريز استعمال ڪندي.

پي سي آر تجربن لاءِ حرارتي سائيڪلر ماڊل جي ڊيزائن پڻ اهم آهي.مثال طور، مٽائڻ وارا ماڊل في رن جي نموني جي تعداد ۾ لچڪدار جي اجازت ڏين ٿا.ان کان علاوه، حرارتي ماڊلز سان گڏ انفرادي طور تي ڪنٽرول ڪرڻ وارا ماڊل مختلف پي سي آر پروگرامن کي هڪ ئي وقت تي هڪ حرارتي سائيڪل تي هلائڻ لاء مثالي آهن.

خودڪار اعلي-ذريعي پي سي آر لاء، سافٽ ويئر جيڪو پائيپنگ هينڊلنگ سسٽم کي ڪنٽرول ڪري ٿو پروگرام ۽ مطابقت هجڻ گهرجي.خودڪار نظام اعليٰ ذريعي پي سي آر جي رد عملن کي انجام ڏيڻ لاءِ مثالي آهن ڇو ته اهي ٿوري انساني مداخلت سان لڳاتار هلائي سگھجن ٿا، ان ڪري دستي تجرباتي سيٽ اپ لاءِ گهربل وقت کي گھٽائي ٿو ۽ مقرر وقت ۾ رد عمل جو تعداد وڌائي ٿو.

Thermal Cyclers جي قابل اعتماد، استحڪام ۽ معيار جي ضمانت

ڪارڪردگي ۽ throughput صلاحيتن کان علاوه، پي سي آر مشين کي پڻ ڪجهه بار بار استعمال، ماحولياتي دٻاء، ۽ شپنگ جي حالتن کي منهن ڏيڻ جي قابل هوندو.ڪجھ ٺاهيندڙن کي رپورٽ ڪري سگھي ٿو ته ڪيئن اوزار معتبر ۽ استحڪام ٽيسٽ انجام ڏئي ٿو.لاڳاپيل PCR اوزار جي چڪاس ۾ شامل آهن:

قابل اعتماد: ميڪيڪل رگ استعمال ڪيا ويندا آهن بار بار ٽيسٽ ڪرڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ اوزارن جي اجزاء جهڙوڪ حرارتي لڪن، ڪنٽرول پينلز/ٽچ اسڪرين، ۽ گرمي پد سائيڪلنگ ماڊلز.

محيطي دٻاء: ماحولياتي چيمبر استعمال ڪري سگھجن ٿا مختلف حالتن جي معمولي تجربن جي نموني ڪرڻ لاء، جهڙوڪ درجه حرارت، نمي.

شپنگ جي جاچ: شديد جھٽڪو ۽ وائبريشن جاچ انٽرنيشنل سيفٽي شپنگ ايسوسيئيشن جي معيارن جي مطابق انجام ڏئي سگھجن ٿيون ته جيئن اوزار اڻڄاتل آپريٽنگ حالتن ۾ اچي سگھي.

وارنٽي ۽ خدمت PCR مشين کي برقرار رکڻ لاء

سخت اعتبار ۽ استحڪام جي جاچ جي باوجود، حرارتي سائيڪلن کي لازمي طور تي اوزار جي زندگي تي ٽيڪنيڪل مسئلا آهن.ذهن جي سلامتيءَ لاءِ، ٺاهيندڙ جي وارنٽي، خدمت ۽ سار سنڀال کي غور ڪرڻ گهرجي جڏهن هڪ اوزار خريد ڪيو وڃي.

خدمتن جي لچڪ جهڙوڪ سائيٽ تي / واپسي کان فيڪٽري جي سار سنڀال، ريموٽ مانيٽرنگ سروسز، ۽ بحالي جي عمل ۾ متبادل اوزار، وغيره، ڪم جي ڪارڪردگي تي اثر گھٽائڻ لاء.

وارنٽي جي مدت جي ڊيگهه، خدمت جي موٽڻ جو وقت، ٽيڪنيڪل سپورٽ جي رسائي، ۽ پيشه ورانه سپورٽ اهلڪارن جون صلاحيتون.

ليبارٽري ۽ لاڳاپيل ريگيوليٽري گهرجن کي پورا ڪرڻ لاء اوزار جي تنصيب، آپريشن، تعاون، ۽ تصديق جي فزيبلٽي.سار سنڀال جون خدمتون جيئن ته درجه حرارت جي تصديق، جاچ، ۽ حساب ڪتاب موجود آهن انهي کي يقيني بڻائڻ لاءِ ته اوزار مناسب نموني سان لاڳاپيل پيٽرول سان انجام ڏئي ٿو.

لاڳاپيل مصنوعات: