ٻڌڻ جي نقصان (HL) انسانن ۾ سڀ کان وڌيڪ عام حسي معذور بيماري آهي.ترقي يافته ملڪن ۾، 80 سيڪڙو ٻارن ۾ ابتدائي ٻوڙن جا ڪيس جينياتي عنصرن جي ڪري ٿين ٿا.سڀ کان وڌيڪ عام آهن سنگل جين جي خرابين (جيئن تصوير 1 ۾ ڏيکاريل آهي)، 124 جين ميوٽيشنز انسانن ۾ غير سنڊومڪ ٻڌڻ جي نقصان سان لاڳاپيل مليا آهن، باقي ماحولياتي عنصر سبب آهن.ڪوڪليئر امپلانٽ (هڪ اليڪٽرانڪ ڊوائيس اندروني ڪن ۾ رکيل آهي جيڪو سڌو سنئون اعصاب کي برقي محرک فراهم ڪري ٿو) سخت HL جي علاج لاء تمام گهڻو اثرائتو اختيار آهي، جڏهن ته ٻڌڻ جي مدد (هڪ ٻاهرئين اليڪٽرانڪ ڊوائيس جيڪو آواز جي لهرن کي تبديل ڪري ٿو ۽ وڌائي ٿو) مريضن جي مدد ڪري سگهي ٿو اعتدال پسند HL سان.تنهن هوندي، في الحال ڪوبه دوا موجود ناهي ته موروثي HL (GHL) جي علاج لاء.تازن سالن ۾، جين تھراپي کي اندروني ڪنن جي خرابي جي علاج لاء ھڪڙو واعدو ڪندڙ انداز جي طور تي ڌيان ڏنو ويو آھي.
تصوير 1.ٻوڙي جي ورڇ سان لاڳاپيل مختلف قسم جي قسم.[1]
تازو، سالڪ انسٽيٽيوٽ ۽ شيفيلڊ يونيورسٽي جي سائنسدانن هڪ تحقيقي نتيجو شايع ڪيو ماليڪيولر ٿراپي - طريقا ۽ ڪلينڪل ڊولپمينٽ [2]، جنهن ۾ ورثي ٻوڙن جي ويوو جين ٿراپي لاءِ وسيع ايپليڪيشن جا امڪان ظاهر ڪيا ويا.يوري منور، سالڪ انسٽيٽيوٽ ۾ اسسٽنٽ ريسرچ پروفيسر ۽ ويٽ سينٽر فار ايڊوانسڊ بائيوفوٽونڪس جي ڊائريڪٽر چيو آهي ته هو پيدا ٿيڻ سان ٻڌڻ جي شديد نقصان سان گڏ هو ۽ محسوس ڪيو ته ٻڌڻ جي بحالي هڪ شاندار تحفو هوندو.هن جي پوئين تحقيق مان معلوم ٿئي ٿو ته Eps8 هڪ actin ريگيوليٽري پروٽين آهي جنهن ۾ هڪٽين بائنڊنگ ۽ ڪيپنگ سرگرمين سان گڏ آهي.cochlear hair cells ۾، Eps8 پاران MYO15A، WHIRLIN، GPSM2 ۽ GNAI3 سان ٺهيل پروٽين جو ڪمپليڪس گهڻو ڪري ڊگھي اسٽيريوسيليا جي ٽوپين ۾ موجود هوندو آهي، جيڪي MYO15A سان گڏ BAIAP2L2 کي ننڍي اسٽيريوسيليا جي ٽِپس تي لوڪلائيز ڪندا آهن، وارن جي سار سنڀال لاءِ گهربل هوندا آهن.تنهن ڪري، Eps8 وار سيلز جي اسٽيريوسيليا جي ڊيگهه کي منظم ڪري سگهي ٿو، جيڪو عام ٻڌڻ جي ڪم لاء ضروري آهي؛Eps8 کي ختم ڪرڻ يا ميوٽيشن کي شارٽ اسٽيريوسيليا جو سبب بڻائيندو، جيڪو اهو آواز کي صحيح طرح سان دماغ جي تصور لاءِ برقي سگنلن ۾ تبديل ڪرڻ کان قاصر هوندو آهي، جنهن جي نتيجي ۾ ٻوڙا ٿي ويندا آهن..ساڳئي وقت، تعاون ڪندڙ والٽر مارڪوٽي، يونيورسٽي آف شيفيلڊ ۾ پروفيسر، ڏٺائين ته وار سيلز عام طور تي Eps8 جي غير موجودگي ۾ ترقي نه ڪري سگھندا آهن.هن مطالعي ۾، منور ۽ مارڪوٽي گڏجي تحقيق ڪئي ته ڇا Eps8 کي اسٽيريوڪيلري سيلز ۾ شامل ڪرڻ سان انهن جي ڪارڪردگي بحال ٿي سگهي ٿي ۽ نتيجي ۾، چوٿين ۾ ٻڌڻ کي بهتر بڻائي سگهجي ٿو.ريسرچ ٽيم ايڊينو ايسوسيئيٽڊ وائرس (AAV) ویکٹر Anc80L65 استعمال ڪيو جنهن ۾ وائلڊ-قسم جي EPS8 تي مشتمل ڪوڊنگ تسلسل Eps8-/- نئين ڄاول P1-P2 چوٿين جي ڪوچليا ۾ گول ونڊو ميمبرين انجيڪشن ذريعي؛ماؤس ڪوچليئر وار سيلز ۾ اسٽيريوسيليا جي ڪم کي ان جي پختگي کان اڳ مرمت ڪئي وئي هئي.۽ مرمت جو اثر اميجنگ ٽيڪنالاجي ۽ اسٽيريوسيليا جي ماپ طرفان منسوب ڪيو ويو.نتيجن مان ظاهر ٿيو ته Eps8 اسٽيريوسيليا جي ڊيگهه کي وڌايو ۽ گهٽ فريکوئنسي سيلز ۾ بال سيل جي ڪم کي بحال ڪيو.انهن اهو پڻ معلوم ڪيو ته، وقت سان گڏ، سيلز هن جين ٿراپي ذريعي بچائڻ جي صلاحيت وڃائي رهيا هئا.مطلب اهو آهي ته هي علاج utero ۾ ڪرڻ جي ضرورت ٿي سگھي ٿي، ڇاڪاڻ ته Eps8-/- وارن جي سيلن کي پختو ٿي سگھي ٿو يا چوٿون پيدا ٿيڻ کان پوء مرمت کان وڌيڪ نقصان گڏ ڪري سگھي ٿو."Eps8 ڪيترن ئي مختلف ڪمن سان گڏ هڪ پروٽين آهي، ۽ اڃا تائين ڳولڻ لاء گهڻو ڪجهه آهي،" منور چيو.مستقبل جي تحقيق ۾ مختلف ترقياتي مرحلن تي ٻڌڻ جي بحالي ۾ Eps8 جين ٿراپي جي اثر جي تحقيق شامل هوندي، ۽ ڇا اهو ٿي سگهي ٿو علاج جي موقعن کي ڊگھو ڪرڻ.اتفاق سان، نومبر 2020 ۾، اسرائيل ۾ تل ابيب يونيورسٽي جي پروفيسر ڪرين بي ابراهم پنهنجا نتيجا جرنل EMBO ماليڪيولر ميڊيسن [3] ۾ شايع ڪيا، هڪ جديد جين ٿراپي ٽيڪنالاجي استعمال ڪندي هڪ بي ضرر مصنوعي ايڊينو سان لاڳاپيل وائرس AAV9-PHP ٺاهي.B، Syne4-/- چوهڙن جي وارن جي خاني ۾ جين جي خرابي کي هڪ وائرس انجيڪشن ذريعي مرمت ڪيو ويو جيڪو Syne4 جي ڪوڊنگ تسلسل کي چوٿين جي اندرين ڪنن ۾ داخل ڪري ٿو، ان کي وارن جي سيلز ۾ داخل ٿيڻ ۽ جينياتي مواد کي ڇڏڻ جي اجازت ڏئي ٿو، انهن کي عام طور تي بالغ ۽ ڪم ڪرڻ جي اجازت ڏئي ٿو (جيئن تصوير 2 ۾).
تصوير 2.اندروني ڪنن جي اناتومي جي اسڪيمياتي نمائندگي، ڪورٽي جي عضون تي ڌيان ڏيڻ ۽ نيسپرن-4 جي سيلولر فنڪشن تي ڌيان ڏيڻ سان.
اهو ڏسي سگهجي ٿو ته جين ٿراپي جو استعمال موروثي بيمارين جي علاج جي مقصد کي حاصل ڪرڻ لاءِ جين سطح تي ڪنهن به ميوٽيٽيڊ جينز کي داخل ڪرڻ، ختم ڪرڻ يا درست ڪرڻ سان (يعني مرض ۾ جينياتي تبديلين کي ڪنٽرول ڪرڻ) جو هڪ اعليٰ ڪلينيڪل اثر آهي.درخواست جا امڪان.جينياتي طور تي ڪمزور ٻوڙن لاءِ موجوده جين علاج جا طريقا هيٺين ڀاڱن ۾ ورهائي سگهجن ٿا:
جين جي متبادل
جين جي متبادل جين جي علاج جو سڀ کان وڌيڪ "سڌو" طريقو آهي، جين جي عام يا جهنگلي قسم جي نقل سان خراب جين کي سڃاڻڻ ۽ تبديل ڪرڻ جي بنياد تي.پهريون ڪامياب اندروني ڪن جين علاج جو مطالعو ٻڌڻ جي نقصان لاءِ جيڪو ويسيڪيولر گلوٽاميٽ ٽرانسپورٽر 3 (VGLUT3) جين کي ختم ڪرڻ جي ڪري؛AAV1-ثالث ترسيل exogenous VGLUT3 اوور ايڪسپريشن جي اندروني ڪن وارن جي سيلز ۾ (IHCs) نتيجي ۾ ٿي سگھي ٿو مسلسل ٻڌڻ جي بحالي، جزوي ربن جي synaptic مورفولوجي بحالي، ۽ ضبطي جوابن [4].جڏهن ته، مٿي ڏنل تعارف ۾ بيان ڪيل ٻن AAV جين متبادلن سميت مثالن ۾، اهو ياد رکڻ ضروري آهي ته خاص قسم جي جين کي ختم ڪرڻ لاءِ استعمال ٿيندڙ ماؤس جا ماڊل موروثي ٻڌڻ جي نقصان جي خرابين لاءِ عارضي طور تي انسانن کان مختلف آهن، ۽ P1 چوٿين ۾، اندروني ڪن ترقي جي بالغ مرحلي ۾ آهي.ان جي ابتڙ، انسان هڪ بالغ اندروني ڪن سان پيدا ٿين ٿا.هي فرق انساني موروثي ٻوڙن جي خرابين جي علاج لاءِ ماؤس جي نتيجن جي ممڪن استعمال کي روڪي ٿو جيستائين جيني علاج بالغ ماؤس جي ڪنن تائين نه پهچايو وڃي.
جيني ايڊيٽنگ: CRISPR/Cas9
”جين مٽائڻ“ جي مقابلي ۾، جين ايڊيٽنگ جي ٽيڪنالاجيءَ جي ترقيءَ جينياتي بيمارين جي علاج جي شروعات جڙ کان وٺي ٿي.خاص طور تي، جين ايڊيٽنگ جو طريقو روايتي اوور ايڪسپريشن جين ٿراپي طريقن جي خامين کي پورو ڪري ٿو جيڪي غالب موروثي ٻوڙن جي بيمارين لاءِ موزون نه آهن، ۽ اهو مسئلو آهي ته اوور ايڪسپريشن جو طريقو گهڻي وقت تائين نه هلندو آهي.چيني محققن کان پوءِ خاص طور تي Myo6C442Y ميوٽنٽ ايليل کي Myo6WT/C442Y چوڪن ۾ AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 جين ايڊيٽنگ سسٽم استعمال ڪندي، ۽ نڪ آئوٽ جي 5 مهينن جي اندر، چوٿين ماڊل جي ٻڌڻ واري ڪم کي بحال ڪيو ويو؛ساڳئي وقت، اهو پڻ ڏٺو ويو ته اندروني ڪن ۾ بال جي سيلز جي بقا جي شرح بهتر ٿي وئي، سيليا جي شڪل باقاعده ٿي وئي، ۽ اليڪٽررو فزيولوجيڪل اشارن کي درست ڪيو ويو [5].هي دنيا ۾ پهريون مطالعو آهي جنهن ۾ CRISPR/Cas9 ٽيڪنالاجي استعمال ڪئي وئي آهي موروثي ٻوڙن جي علاج لاءِ جيڪا Myo6 جين ميوٽيشن سبب پيدا ٿئي ٿي، ۽ اها موروثي ٻوڙن جي علاج لاءِ جين ايڊيٽنگ ٽيڪنالاجي جي هڪ اهم تحقيقي پيش رفت آهي.علاج جو ڪلينڪ ترجمو هڪ مضبوط سائنسي بنياد فراهم ڪري ٿو.
جين تھراپي پهچائڻ جا طريقا
جين ٿراپي جي ڪامياب ٿيڻ لاءِ، ننگا ڊي اين اي ماليڪيول پنهنجي هائيڊروفيليسيٽي ۽ فاسفيٽ گروپن جي ناڪاري چارج جي ڪري سيلز ۾ مؤثر طريقي سان داخل نه ٿا ٿي سگهن، ۽ ضمني نيوڪليڪ ايسڊ ماليڪيولز جي سالميت کي يقيني بڻائڻ لاءِ، هڪ محفوظ ۽ موثر طريقو چونڊيو وڃي.مڪمل ٿيل ڊي اين اي ٽارگيٽ سيل يا ٽشو تائين پهچايو ويندو آهي.AAV وڏي پيماني تي بيماري جي علاج لاءِ ترسيل گاڏي جي طور تي استعمال ڪيو ويندو آهي ڇاڪاڻ ته ان جي اعلي انتشار واري اثر، گهٽ مدافعتي صلاحيت، ۽ مختلف قسم جي ٽشوز تائين وسيع tropism.في الحال، تحقيق جي ڪم جو هڪ وڏو ادارو مائوس ڪوچليا ۾ مختلف سيلن جي قسمن جي نسبت AAV جي مختلف ذيلي قسمن جي tropism کي طئي ڪيو آهي.AAV پهچائڻ جي خاصيتن کي استعمال ڪندي سيل-مخصوص پروموٽرز سان گڏ سيل-مخصوص اظهار حاصل ڪري سگھن ٿا، جيڪو ٽارگيٽ اثر کي گھٽائي سگھي ٿو.ان کان علاوه، روايتي AAV ویکٹر جي متبادل جي طور تي، نوان مصنوعي AAV ویکٹر مسلسل ترقي ڪري رهيا آهن ۽ اندروني ڪن ۾ اعلي ٽرانسڪشن جي صلاحيت ڏيکاري رهيا آهن، جن مان AAV2/Anc80L65 تمام وڏي پيماني تي استعمال ٿيل آهي.غير وائرل ترسيل طريقن کي وڌيڪ تقسيم ڪري سگهجي ٿو جسماني طريقن (مائڪرو انجيڪشن ۽ اليڪٽرروپوريشن) ۽ ڪيميائي طريقن (لپڊ تي ٻڌل، پوليمر تي ٻڌل، ۽ سون جي نانو ذرات).ٻنهي طريقن کي موروثي ٻوڙي جي بيماري جي علاج ۾ استعمال ڪيو ويو آهي ۽ مختلف فائدا ۽ حدون ڏيکاريا آهن.گاڏي جي طور تي جين ٿراپي لاءِ ترسيل گاڏي کان علاوه، وييو جين ايڊمنسٽريشن لاءِ مختلف طريقا استعمال ڪري سگھجن ٿا مختلف ٽارگيٽ سيل جي قسمن، انتظاميه جا رستا، ۽ علاج جي افاديت جي بنياد تي.اندروني ڪن جي پيچيده ساخت کي ٽارگيٽ سيلز تائين پهچڻ ڏکيو بڻائي ٿو ۽ جينوم ايڊيٽنگ ايجنٽ جي ورڇ سست آهي.جھلي واري ليبرينٿ عارضي هڏن جي بوني ليبرينٿ جي اندر واقع آهي ۽ ان ۾ ڪوڪليئر ڊڪٽ، سيمي سرڪيولر ڊڪٽ، يوٽريڪل ۽ بلون شامل آهن.ان جي لاڳاپي جي اڪيلائي، گھٽ ۾ گھٽ لففيڪ گردش، ۽ رت کان جدا ٿيڻ واري بلڊ-مزيز رڪاوٽ ذريعي علاج جي اثرائتي سسٽماتي ترسيل کي محدود ڪري ٿو صرف نون ٻارن جي چوٿين تائين.جين ٿراپي لاءِ موزون وائرل ٽائيٽرز حاصل ڪرڻ لاءِ، وائرل ویکٹرز جي سڌي مقامي انجيڪشن کي اندروني ڪن ۾ داخل ڪرڻ ضروري آهي.انجيڪشن جا قائم ڪيل رستا شامل آهن [6]: (1) گول ونڊو جھلي (RWM)، (2) tracheostomy، (3) endolymphatic or perilymphatic cochleostomy، (4) گول ونڊو جھلي پلس Tube fenestration (CF) (جيئن تصوير 3 ۾).
تصوير 3.جين تھراپي جي اندروني ڪن جي ترسيل.
جيتوڻيڪ جين ٿراپي ۾ ڪيتريون ئي اڳڀرائيون ڪيون ويون آهن، ڪلينڪل ترجمي جي مقصدن جي بنياد تي، وڌيڪ ڪم ڪرڻ جي ضرورت آهي ان کان اڳ ته جين ٿراپي جينياتي بيمارين سان مريضن لاءِ پهرين لائين علاج جو اختيار بڻجي سگهي، خاص طور تي محفوظ ۽ موثر ویکٹرز ۽ ترسيل طريقي جي ترقي ۾.پر اسان کي يقين آهي ته ويجهي مستقبل ۾، هن قسم جا علاج ذاتي علاج جو هڪ اهم حصو بڻجي ويندا ۽ جينياتي خرابين ۽ انهن جي خاندانن جي زندگين تي تمام گهڻو مثبت اثر پوندو.
Foregene ٽارگيٽ ڪيل جينز لاءِ هڪ اعليٰ-ٿروپٽ اسڪريننگ ڪٽ پڻ شروع ڪيو آهي، جيڪو تيز آهي ۽ آر اين اي ڪڍڻ کان سواءِ ريورس ٽرانسڪرپشن ۽ qPCR رد عمل انجام ڏئي سگهي ٿو.
پراڊڪٽ لنڪس
Cell Direct RT-qPCR کٽ- Taqman/SYBR GREEN I
وڌيڪ پيداوار جي معلومات لاء، مهرباني ڪري رابطو ڪريو:
پوسٽ ٽائيم: سيپٽمبر-02-2022
