W:ڀاءُ، ريورس ٽرانسڪرپشن مڪمل ٿي چڪي آهي، ۽ آخرڪار آخري مرحلو - فلورسنٽ مقداري پي سي آر!اي، ڀاءُ، حقيقي وقت مقداري پي سي آر ڇا آهي؟
ايم: پي سي آر توهان کي هميشه خبر آهي، صحيح؟
W:توهان کي خبر آهي ته PCR پوليميرس چين جو ردعمل آهي، ۽ اها هڪ ٽيڪنالاجي آهي جيڪا ڊي اين اي وڌائي ٿي!
M:اهو لڳ ڀڳ آهي... اهو هڪ ٽيڪنيڪل طريقو آهي جنهن کي مخصوص پرائمر ذريعي هڪ لک کان وڌيڪ ڀيرا ٽارگيٽ جي تسلسل کي وڌايو وڃي، پر اهو صرف ٽارگيٽ جي تسلسل جي موجودگي يا غير موجودگيءَ کي ظاهر ڪري ٿو، ۽ ابتدائي ٽيمپليٽ جي مقدار جو تعين نٿو ڪري سگهي.fluorescence quantitative PCR هڪ ٽيڪنيڪل طريقو آهي جيڪو هن مسئلي کي حل ڪرڻ لاءِ تيار ڪيو ويو آهي.حقيقي وقت PCR ۽ مقدار PCR (qPCR) عام طور تي ان جو حوالو ڏنو.
W: عام پي سي آر کان فرق فلورسنس مقدار ۾ آهي؟
M: ها، اهو آهي، هر PCR چڪر جي واڌ واري مرحلي ۾، فلورسنس سگنل جي شدت معلوم ٿئي ٿي، ۽ شروعاتي ٽيمپليٽ رقم سگنل جي شدت جي تبديلي جي مطابق حساب ڪري سگهجي ٿو.
W: اهو تمام پيچيده محسوس ٿئي ٿو!ڇا مون کي پنهنجو پاڻ سان اهو حساب ڪرڻو پوندو؟
م: ان لاءِ توهان کي سست رفتاري سان سکڻ جي ضرورت آهي، اهو بهتر آهي ته توهان اصول کي سمجهڻ جي قابل ٿي وڃو.ھاڻي توھان CT قدر تي ڌيان ڏئي سگھو ٿا پھريون، جيڪو نسبتاً وجداني تجرباتي ڊيٽا آھي، ۽ ان جي ماپ ابتدائي ٽيمپليٽ جي مقدار جي برابر آھي.هتي پڻ گرافس آهن جهڙوڪ ايمپليفڪيشن وکر ۽ پگھلڻ واري وکر.انهن وٽ حتمي چوڻ آهي ته ڇا توهان جو تجربو ڪامياب آهي يا نه.
و: او، ڀاءُ.پوءِ مان qPCR تجربو ڪرڻ وارو آهيان!
م: خاص ڌيان ڏيو ته ٽيمپليٽس کي ريگينٽ واري علائقي ۾ شامل نه ڪيو وڃي، ٻي صورت ۾ توهان جو غير استعمال ٿيل مرکب آساني سان آلوده ٿي ويندو!
W: سمجهي ويو!

حقيقي وقت PCR Easyᵀᴹ-SYBR گرين I کٽ

اعلي ڪارڪردگي، وڏي خاصيت
اعلي حساسيت، سٺي مطابقت