پي سي آر جا طريقا ۽ نيوڪلڪ ايسڊ ايروسول آلودگي نيوڪليڪ ايسڊ ٽيسٽنگ ليبارٽريز ۾ هڪ سڪي جا ٻه پاسا آهن.اسان صرف اهو چونڊي سگهون ٿا ته اهو هجي يا نه، پر اسان اهو نه چونڊي سگهون ٿا ته اسان اهو چاهيون ٿا يا خرچ ڪيو.

1. ڊي اين اي هٽائڻ واري اسڪريننگ

نيوڪليڪ ايسڊ ايروسول آلودگي جي مقامي هٽائڻ کي حاصل ڪرڻ لاء، سڀ کان پهريان ضروري آهي ته ڊي اين اي هٽائڻ وارن کي اسڪريننگ ڪيو وڃي جيڪي مائع حالت ۾ نيوڪليڪ ايسڊ کي ختم ڪري سگهن ٿيون.ڇو ته اهڙا ڪيترائي ڊي اين اي هٽائڻ وارا نه آهن جيڪي واقعي ڪم ڪن ٿا.تجرباتي طريقي لاءِ مهرباني ڪري ڏسو: ڊي اين اي هٽائڻ وارو ليبارٽري جو ”خفيه ڪنڊ“ نٿو ٿي سگهي!

هن تجربي ۾، 100 ڪاپيون/μL (CT لڳ ڀڳ 31) ASFV پلازميڊ ۽ ڊي اين اي ريموور جي مقدار کي ڊجيٽل پي سي آر پاران مقدار ۾ برابر مقدار ۾ ملايو ويو، ۽ پوءِ ترتيب سان 10 منٽ، 20 منٽ ۽ 30 منٽ لاءِ ڪمري جي حرارت تي رد عمل ڪيو ويو.نيوڪليڪ ايسڊ ڪڍڻ کان پوء، qPCR امپليڪشن ڪيو ويو.هڪ مثبت ڪنٽرول پلاسميڊ ۽ پاڻي سان ملايو ويو مقابلو ڪيو ويو.جيئن ته تجربو هڪ ئي وقت مڪمل نه ڪيو ويو هو، اتي نتيجن جي وچ ۾ هڪ خاص انحراف ٿي سگهي ٿو، پر اهو تجربو جي نتيجي تي اثر انداز نٿو ڪري.هينئر تائين، مون 10 تجارتي ڊي اين اي هٽائڻ واري شين جو جائزو ورتو آهي.صرف نمبر 1، نمبر 6 ۽ نمبر 8 پروڊڪٽس پلاسميڊ ڊي اين اي کي مائع حالت ۾ مؤثر طريقي سان ختم ڪري سگھن ٿيون.ٻيا پراڊڪٽ لڳ ڀڳ ڪو اثر نه آهن.

جدول 1 تجارتي طور تي دستياب ڊي اين اي ريموور جو نيوڪليڪ ايسڊ ختم ڪرڻ وارو اثر

2. عام طور تي استعمال ٿيندڙ جراثيمن جي ڊي اين اي ختم ڪرڻ واري اثر جو تجربو

1. عام طور تي استعمال ٿيندڙ جراثيمن جي اسڪريننگ

اتي ڪيترائي قسم جا جراثيم ڪش آهن جيڪي عام طور تي ليبارٽريز ۾ استعمال ٿيندا آهن: الڊي هائيڊس، فينول، الڪوحل، چوٿون امونيم سالٽ، پر آڪسائيڊس، کلورين تياريون، ۽ تيزاب ۽ بيس.انهن جراثيمن جي جراثيمن جي جراثيم ڪش اثرن جي مڪمل طور تي تجربن جي ذريعي تصديق ڪئي وئي آهي، پر نيوڪليڪ ايسڊز جي تباهي واري اثر تي ڪافي تجرباتي ڊيٽا موجود نه آهن.نيوڪليڪ ايسڊ ٽيسٽنگ ليبارٽريز کي جراثيم ڪش جي ضرورت آهي جيڪا نه رڳو مائڪروجنزمن تي سٺو جراثيم ڪش اثر رکي ٿي پر ڊي اين اي کي به خراب ڪري سگهي ٿي.ٽيسٽ جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته صرف ٻه ڪلورين تياريون 84 جراثيم ڪش ۽ ٽريچلوروآئسوسيانورڪ ايسڊ ۽ 1 ايم هائڊروڪلورڪ ايسڊ گهرجن کي پورو ڪن ٿيون.جيئن ته 1 M هائڊروڪلورڪ ايسڊ انتهائي corrosive آهي، اها سفارش ڪئي وئي آهي ته ڪلورين جي تيارين کي نيوڪليڪ ايسڊ ٽيسٽنگ ليبارٽريز ۾ فضول نيڪال جي طور تي استعمال ڪيو وڃي.بهرحال، ڪلورين جون تياريون ڌاتن لاءِ corrosive آهن ۽ اوزارن ۽ سامان جي نيڪال لاءِ استعمال نه ٿيون ڪري سگهجن.

جدول 2 مختلف قسم جي جراثيمن جي ڊي اين اي ختم ڪرڻ جا اثر

2. ڪلورين جي تيارين جي گھٽ ۾ گھٽ اثرائتي ڪنسنٽريشن

ڪلورين تي ٻڌل جراثيمن جو مضبوط ڊي اين اي ڊيگريڊيشن اثر هوندو آهي، پر انهن جي ڌاتو جي خرابي ۽ جلن جي ڪري، اهي فرش کي صاف ڪرڻ، نان ميٽيل ڪائونٽر ٽاپ، سوڪنگ ٽوپس، سينٽريفيوج ٽيوب ۽ ٻيون ٽيسٽ شيون استعمال ڪري سگهجن ٿيون.

”نئين ڪورونري نمونيا ايپيڊيمڪ ڊس انفڪشن ٽيڪنيڪل ھدايتن“ جي مطابق: آلودگي (مريضن جو رت، رطوبت ۽ الٽي) موجود ڪلورين 5g/L-10g/L ڪلورين تي مشتمل جراثيم ڪش؛فرش، ڀتين ۽ اعتراض جي سطحن تي موجود ڪلورين 1g/L ڪلورين جراثيم ڪش استعمال ڪيو وڃي ٿو: ڪپڙا، بسترا ۽ ٻيا ڪپڙا پهريان 30 منٽن لاءِ 0.5g/L موجود ڪلورين سان جراثيم ڪش ڪلورين ۾ ڀاڄيا وڃن، ۽ پوءِ معمول مطابق صاف ڪيا وڃن.

ٽيبل 3 ڊي اين اي ختم ڪرڻ جو اثر مختلف ڪنسنٽريشن جي ڪلورين جراثيم ڪش

ٽيسٽ جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته: جڏهن مؤثر ڪلورين ڪنسنٽريشن 1.2 g/L کان وڌيڪ يا ان جي برابر آهي، ڪلورين تي مشتمل جراثيم ڪش 100 ڪاپي/μL پلازميڊ کي مڪمل طور تي خراب ڪري سگهي ٿو جڏهن اهو 5 منٽن لاءِ استعمال ڪيو وڃي.جڏهن 10 منٽن لاءِ عمل ڪيو وڃي، 84 جراثيم ڪش ڪندڙ هڪ مؤثر ڪلورين ڪنسنٽريشن سان 0.6 g/L کان وڌيڪ يا ان جي برابر پلاسميڊ جي 100 ڪاپيون/μL مڪمل طور تي خراب ڪري سگهن ٿا.

3. نيوڪليڪ ايسڊ ايروسول ذريعي آلوده هوا کي ختم ڪرڻ جو تجربو

نيوڪليڪ ايسڊ ايروسول جي آلودگي کي ڪيئن صاف ڪجي؟اڪثر سوچون ايروسول آلوده ماحول پيدا ڪرڻ ۽ پوءِ ان کي صاف ڪرڻ، يا آلودگي کان پوءِ نيوڪليڪ اسيد کي صاف ڪرڻ لاءِ آهن.منهنجي لاءِ، هڪ اهڙو تجربو جيڪو بار بار نه ٿو ڪري سگهجي ۽ تجربي جي نتيجن جو مقداري طور تي تجزيو نه ٿو ڪري سگهجي، بي معنيٰ آهي، تنهن ڪري مون جراثيم ڪش هوا جي جراثيم کي ختم ڪرڻ جا ڪجهه طريقا قرض ورتو.ڏسو "GB27948-2020 هوائي جراثيمن لاءِ عام ضرورتون" ۽ "ڊس انفڪشن ٽيڪنيڪل وضاحتون"

1. ٽيسٽ مواد

1.1 ڊي اين اي هٽائيندڙ: هن تجربي ۾، ٻه تجارتي طور تي دستياب ڊي اين اي هٽائڻ وارا 6 ۽ 8 ٽيبل 1 ۾ چونڊيا ويا.

1.2 ٽيسٽ پلازميڊ: غور ڪندي ته اڪثر ليبارٽري آلودگي جي CT قدر 30 کان وڌيڪ هوندي، هن وقت استعمال ٿيل ASFV جين پلازميڊ جو ڪنسنٽريشن تقريباً 100 ڪاپيون/μL آهي، ۽ فلورسنٽ مقداري PCR CT اٽڪل 31.07 آهي.پلاسمڊ شامل ڪريو فلڪنگ ڪپهه جي swab ۽ هوا ۾ خشڪ.

1.3 ٽيسٽ اوزار: Bilingkehan KVBOX ڊس انفڪشن جو اوزار، جيڪو مهرباني ڪري شينزين رنلين انوائرمينٽل ٽيڪنالاجي ڪمپني، لميٽيڊ طرفان سهڪار ڪيو ويو آهي، هائڊروجن پرڪسائيڊ جراثيم ڪش سان گڏ بهترين ايئر ڊس انفڪشن ڪارڪردگي آهي، ۽ مؤثر طريقي سان spores ۽ ٻين microorganisms کي ماري سگهي ٿو.

1.4 ٽيسٽ اسپيس: اٽڪل 0.1 ڪعبي ميٽر جي هڪ بند منتقلي ونڊو.

2. ٽيسٽ جو طريقو

ڊس انفڪشن مشين تي مقرر ڪيل جراثيم ڪش جو مقدار 10ml/m3 آهي، ۽ ڪنسنٽريشن 100ml/m3 آهي، جيڪو "GB27948-2020 عام ضرورتن لاءِ ايئر ڊس انفڪشن" کان تمام گهڻو آهي: ايروسول اسپري ڊس انفڪشن استعمال ڪرڻ وقت، جراثيم ڪش جو مقدار ≤10 ml/m3 هجڻ گهرجي.