1: تجرباتي سامان کي وقت ۾ تبديل ڪريو

سيٽ اپ (NTC) منفي ڪنٽرول ۽ ان کي ڪيترائي ڀيرا ورجايو.هڪ دفعو اهو معلوم ٿئي ٿو ته ليبارٽري ۾ PCR پراڊڪٽ آلودگي آهي، وقت ۾ سڀني تجرباتي سامان کي تبديل ڪريو.جيئن ته: پرائمر کي ٻيهر نرم ڪرڻ ۽ تيار ڪرڻ، پائيپٽ جي ٽپ کي ٻيهر جراثيم ڪرڻ، EP ٽيوب، ddH2O وغيره، نئين پائيپٽ سان تبديل ڪرڻ، ۽ PCR تجربن کي انجام ڏيڻ لاءِ عارضي طور تي ٻين ليبارٽرين کي قرض ڏيڻ.آلودگي واري ليبارٽري کي الٽرا وائلٽ شعاعن سان هوادار ۽ شعاع ڪرڻ گهرجي جيستائين تجربو سان اڳتي وڌڻ کان اڳ PCR پروڊڪٽ جي آلودگي کي ختم نه ڪيو وڃي.

2: UV نمائش جو وقت وڌايو

اها ڳالهه نوٽ ڪرڻ جي قابل آهي ته ڊي اين اي آلودگي کي ختم ڪرڻ لاء، باقاعده الٽراوائلٽ تابڪاري کي معمول کان 2 ڪلاڪ وڌايو وڃي.تنهن هوندي به، DNA آلودگي جي ننڍڙن ٽڪرن (200bp کان هيٺ) کي هٽائڻ تي UV شعاع جو اثر اڃا به سٺو ناهي.

الٽرا وائلٽ موج جي ڊيگهه (nm) عام طور تي 254/300nm آهي، ۽ اهو 30 منٽن لاء شعاع ڪرڻ لاء ڪافي آهي.اهو ياد رکڻ گهرجي ته جڏهن UV چونڊيو وڃي ته بقايا پي سي آر جي شين جي آلودگي کي ختم ڪرڻ لاء، پي سي آر جي پيداوار جي ڊيگهه ۽ پيداوار جي ترتيب ۾ بنيادن جي تقسيم کي غور ڪيو وڃي.UV شعاع صرف 500 bp کان مٿي ڊگھي ٽڪرن لاءِ اثرائتو آھي، ۽ ٿورڙي ٽڪرن تي اثر گھٽ ٿئي ٿي.

UV شعاعن جي دوران، PCR پراڊڪٽ ۾ pyrimidine bases dimers ٺاهيندا.اهي ڊائمر ايڪسٽينشن کي ختم ڪري سگهن ٿا، پر ڊي اين اي زنجير ۾ موجود سڀئي پيريمائڊائن ڊائمر نه ٺاهي سگهن ٿا، ۽ يو وي شعاع به ڊمرز کي ٽوڙي سگهن ٿا..ڊيمر ٺهڻ جي درجي جو دارومدار UV موج جي ڊيگهه، pyrimidine dimer جي قسم ۽ dimer سائيٽ جي ڀرسان نيوڪليوٽائڊس جي ترتيب تي منحصر آهي.تنهن ڪري، جيڪڏهن پي سي آر جي وڌايل ٽڪرا ننڍا آهن، اها سفارش ڪئي وئي آهي ته يو اين جي اينٽي پي سي آر پروڊڪٽ آلودگي واري نظام کي استعمال ڪيو وڃي.

3: عام طور تي استعمال ٿيل ڊي اين اي آلودگي اسڪينجرز

ايروسول آساني سان ٺاهيا ويندا آهن جڏهن پائپ شامل ڪيا ويندا آهن، جنهن کان بچڻ ڏکيو آهي، ۽ اهو جلدي آباد ٿيندو.تنهن ڪري، اهو بلاشڪ هڪ سٺو انتخاب آهي ته اڪثر خاص ڊي اين اي آلودگي اسڪينجرز کي استعمال ڪرڻ لاءِ ڊي اين اي آلودگي جي پکيڙ کي روڪڻ لاءِ.

4: UNG مخالف آلودگي نظام استعمال ڪريو

PCR مصنوعات جي آلودگي کي هٽائڻ کان پوء، ٽيسٽنگ ليبارٽري استعمال ڪري سگهي ٿي UNG مخالف PCR پيداوار آلودگي نظام PCR پيداوار جي آلودگي کي روڪڻ لاء.عام ليبارٽرين ۾، توهان سادي تجرباتي ورهاڱي کي انجام ڏئي سگهو ٿا، سختي سان PCR پراڊڪٽ واري علائقي کي ٻين علائقن کان الڳ ڪري، ڪجهه ليبارٽري قاعدن ۽ ضابطن کي قائم ڪري، ۽ PCR پراڊڪٽ جي آلودگي جي واقعن کي روڪڻ لاءِ لاڳاپيل ٽريننگ هلائي.

تجويزون: هڪ مناسب پي سي آر ليبارٽري قائم ڪرڻ، سٺو پي سي آر ماحول برقرار رکڻ، معياري پي سي آر آپريٽنگ طريقا تيار ڪرڻ، ۽ تجربيڪارن جي سخت آپريٽنگ آگاهي پيدا ڪرڻ پي سي آر تجربن جي آلودگي کي روڪڻ يا گهٽائڻ لاءِ ڪنجيون آهن.