• فيسبوڪ
  • ڳنڍيل
  • يوٽيوب

Buccal swab/FTA ڪارڊ ڊي اين اي ڪڍڻ واري کٽ

ممڪن مسئلن جي هيٺيان تجزيوبکلswab/ايف ٽي اي card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

 

صاف ڪرڻ وارو ڪالم بند ٿيل آهي

 

 

هن کٽ ۾، جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ واري آپريشن ۾، صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي سڌو سنئون نموني اينزيميٽڪ ليسس مرکب تي سينٽرفيوگريشن قدم کان سواء جذب ڪيو ويندو آهي، ۽ نموني جي نامڪمل اينزيمائيزيشن ۽ اعلي ويسڪوسيٽي جي ڪري صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي بلاڪ ٿي سگهي ٿو.

هيٺيان ممڪن سبب آهن:

1. ٽشو نموني جي نامڪمل اينزيميٽڪ هضم.

تجويز: Foregene Protease جي نموني پروسيسنگ وقت کي مناسب طور تي وڌايو وڃي يا سپرنيٽنٽ کي سينٽرفيوگريشن کان پوءِ 12,000 rpm (~ 13,400) تي وٺي سگهجي ٿو× g) 5 منٽ لاء.

2. ٽشو نموني يا وڏي ٽشوز جو گهڻو استعمال.

سفارش: اهو بهتر آهي ته 1 کان وڌيڪ نه هجيبکل نموني ۾ swab؛جيڪڏهن نمونو تمام وڏو آهي، ان مطابق بفر ST1، Foregene Protease، بفر ST2 جو دوز وڌايو.

3. نموني viscosity تمام اعلي آهي.

سفارش: نمونن کي جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ کان اڳ 10 ايم ايم ٽريس-ايڇ سي ايل سان مناسب طور تي ملائي سگھجي ٿو.

4. رت جي ڪارڊ جا ٽڪرا چوسي ويا آهن.

سفارش: بلڊ اسپاٽ (FTA ڪارڊ) جينوميڪ ايڪسٽريشن جي اسٽيپ 6 جو عارضي سينٽرفيوگريشن ٽائيم مناسب طور تي وڌايو وڃي.

 

گھٽ پيداوار يا ڪو ڊي اين

 

عام طور تي مختلف عنصر آهن جيڪي جينوميڪ ڊي اين اي جي پيداوار تي اثر انداز ڪن ٿا، جن ۾ نموني جي اصليت، نموني اسٽوريج حالتون، نموني تيار ڪرڻ، هٿرادو وغيره شامل آهن.

جينوميڪ ڊي اين اي حاصل نه ٿي ڪري سگھجي ٿو ڪڍڻ دوران

ممڪن سبب هن ريت آهن:

1. نمونن جي غير مناسب حفاظت يا تمام گهڻي عرصي تائين رکڻ سان جينومڪ ڊي اين اي جي تباهي ٿيندي آهي.

سفارش: زباني swabs کي ترجيحي طور تي تازو نمونو وٺڻ گهرجي، ۽ جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ جي عملن لاء محفوظ ٿيل swabs استعمال ڪرڻ جي صلاح نه آهي؛رت جي جڳهن جي نموني کي يقيني بڻائڻ گهرجي ته معيار قابل آهي ۽ اسٽوريج وقت تمام ڊگهو نه هجڻ گهرجي.

2. ٽشو جي تمام گھٽ استعمال جي نتيجي ۾ لاڳاپيل جينومڪ ڊي اين اي جي نڪتل ٿي سگھي ٿي.

سفارش: جي تابعداري ڪريوبوڪاl آپريشن گائيڊ ۾ swab جي نمونن جي هدايتون، ۽ جيترو ممڪن طور تي ڪيترائي ڀيرا مسح ڪريو ته جيئن ڪافي سيلز زباني swab سان ڳنڍي سگهجن جيئن جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ لاءِ؛رت جي جڳه جو نمونو ڪڍڻ لاء، رت جي جڳهه جي ڪٽڻ واري علائقي کي مناسب طور تي وڌائي سگھجي ٿو.

3. Foregene Protease غلط طور تي محفوظ ٿيل آهي، جنهن جي نتيجي ۾ ان جي سرگرمي ۾ گهٽتائي يا غير فعال ٿيڻ.

سفارش: اسٽوريج جي حالتن جي تصديق ڪريوايفoregene Protease يا ان کي نئين فاريني پروٽيز سان تبديل ڪريو اينزيميٽڪ ردعمل لاءِ.

4. کٽ جي غلط پرزرويشن يا اسٽوريج جو وقت تمام ڊگهو آهي، جنهن جي نتيجي ۾ کٽ جي ڪجهه حصن جي ناڪامي آهي.

سفارش: هڪ نئون خريد ڪريوبکل swab DNAاڪيلائي لاڳاپيل طريقيڪار لاء ڪٽ.

5. بفر WB مطلق ايٿانول شامل نٿو ڪري.

سفارش: تصديق ڪريو ته بفر WB مطلق ايٿانول جو صحيح حجم شامل ڪري ٿو.

6. ايليوٽ صحيح طور تي سلڪون فلم ۾ شامل نه ڪيو ويو آهي.

سفارش: 65 شامل ڪريو°Cاڳي گرم ٿيل ايليوئنٽ سلڪون جھلي جي وچ ۾ اچي ٿو ۽ 5 منٽ لاء ڪمري جي گرمي پد تي ڇڏي ڏيو ته جيئن ايليوشن ڪارڪردگي کي وڌايو وڃي.

Lجينومڪ ڊي اين اي جي پيداوار الڳ ٿيل

هيٺيان ممڪن سبب آهن:

1. نمونن جي غير مناسب حفاظت يا تمام گهڻي عرصي تائين رکڻ سان جينومڪ ڊي اين اي جي تباهي ٿيندي آهي.

سفارش: زباني swabs ترجيحي طور تي تازي نموني سان، ۽ محفوظ ٿيل swabs جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ لاء استعمال نه ڪيو وڃي.

2. جيڪڏهن ٽشو نموني جو مقدار تمام ننڍڙو آهي، ڪڍيل جينوميڪ ڊي اين اي مواد گهٽ ٿيندو.

سفارش: آپريٽنگ گائيڊ ۾ ڏنل زباني swab سيمپلنگ جي هدايتن تي عمل ڪريو، جيترو ممڪن ٿي سگهي مسح ڪريو ته جيئن جينومڪ ڊي اين اي ڪڍڻ لاءِ ڪافي سيلز زباني swab سان ڳنڍجي سگهن.

3. Foregene Protease غلط طور تي محفوظ ٿيل آهي، جنهن جي نتيجي ۾ ان جي سرگرمي ۾ گهٽتائي يا غير فعال ٿيڻ.

سفارش: اسٽوريج جي حالتن جي تصديق ڪريوthe Foregene Protease يا ان کي نئين سان تبديل ڪريو اينزيميٽڪ ردعمل لاء فاريني پروٽيز.

4. Eluent مسئلا.

سفارش: Elution لاء بفر EB استعمال ڪريو؛جيڪڏهن ddH استعمال ڪري رهيا آهيو2اي يا ٻيون ايليوئنٽس، تصديق ڪريو ته ايليويٽ جي پي ايڇ 7.0-8.5 جي وچ ۾ آهي.

5. ايليوٽ صحيح طور تي شامل نه ڪيو ويو آهي dropwise.

سفارش: سلڪون جھلي جي وچ ۾ ايليوئنٽ ڦڙا شامل ڪريو ۽ 5 منٽ لاء ڪمري جي حرارت تي ڇڏي ڏيو ته جيئن ايليوشن ڪارڪردگي کي وڌايو وڃي.

6. ايليوشن مائع تمام ٿورو جمع ٿئي ٿو.

سفارش: گهٽ ۾ گهٽ هدايتن ۾ گهربل ڊي اين اي ايليوشن لاءِ ايليوئنٽ استعمال ڪريوگهٽ نه 15 کان وڌيڪμl.

Lاي پاڪائي of جينوميڪ ڊي اين ايالڳ ٿيل

گھٽ جينومڪ ڊي اين اي جي خالصيت ھيٺئين تجربن جي ناڪامي يا غير اطمينان بخش نتيجن جو سبب بڻجي سگھي ٿي، جھڙوڪ: اينزائمز کليل نه ٿي سگھن ٿيون، پي سي آر دلچسپي جي جين جو ٽڪرو حاصل نه ڪري سگھي، وغيره.

ممڪن سبب هن ريت آهن:

1. Heteroprotein آلودگي، آر اين اي آلودگي.

تجزيو: صاف ڪرڻ وارو ڪالم بفر PW استعمال ڪندي نه ڌوئي ويو.بفر PW واش صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي صحيح سينٽرفيوگل رفتار استعمال ڪندي نه ڌويو ويو.

سفارش: پڪ ڪريو ته ايٿانول شامل ڪرڻ کان اڳ سپرنيٽنٽ ۾ ڪو به ورن نه آهي؛هدايتن جي مطابق صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ڌوئڻ جي پڪ ڪريو، ۽ اهو قدم ختم نه ٿو ڪري سگهجي.

2. Impurity آئن آلودگي.

تجزيو: بفر WB واش صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ختم ڪيو ويو يا صرف هڪ ڀيرو ڌوئڻ، نتيجي ۾ بقايا آئنڪ آلودگي جي نتيجي ۾.

سفارش: بفر WB کي 2 ڀيرا ڌوئي پڪ ڪريو جيئن ممڪن حد تائين باقي بچيل آئن کي هٽائڻ جي هدايت ڪئي وئي آهي.

3. آر اين اي اينزيم آلودگي.

تجزيو: پرڏيهي RNases بفر ۾ شامل ڪيا ويا؛Buffer PW واش آپريشن غلط هو، جنهن جي نتيجي ۾ RNase رهجي ويا، هيٺيون وهڪرو آر اين اي تجرباتي عملن کي متاثر ڪيو، جهڙوڪ ويٽرو ٽرانسپشن ۾.

سفارش: Foregene سيريز nucleic acidisolation ڪٽ آر اين اي کي ختم ڪري سگھن ٿا بغير RNase جي اضافي اضافو،اهڙيء طرح buccal Swab/FTA ڪارڊ DNA Isolation Kitضرورت't RNase شامل ڪريو؛بفر PW ڌوئڻ صاف ڪرڻ واري ڪالمن جي هدايتن تي عمل ڪرڻ جي پڪ ڪريو، ۽ هن قدم کي ختم نٿو ڪري سگهجي.

4. Ethanol residue.

تجزيو: بفر WB صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ڌوئڻ کان پوءِ خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن انجام نه ڏنو.

سفارش: هدايتن جي مطابق صحيح خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن ڪريو.

5. ٻين نجاست آلودگي.

تجزيو: محفوظ ٿيل نمونا يا خاص نمونا اڳ ۾ نه هوندا آهن.

سفارش: هدايت جي مطابق نموني کي چڱي طرح تيار ڪريو.

 


پوسٽ ٽائيم: مارچ-18-2022