FAQ جي لاءِجانورن جي ڪل آر اين اي آئسوليشن کٽ

هيٺ ڏنل تجزيي جي مسئلن جو توهان کي منهن ڏئي سگھي ٿوجانورن جي بافتو / سيل آر اين اي ڪڍڻ will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

آر اين اي نه ڪڍيو ويو آهي يا آر اين اي جي پيداوار گهٽ آهي

عام طور تي ڪيترائي عنصر آھن جيڪي وصولي جي ڪارڪردگي کي متاثر ڪن ٿا، جھڙوڪ: ٽشو نموني آر اين اي مواد، آپريشن جو طريقو، ايليوشن حجم، وغيره.

1. آئس باٿ يا ڪريوجينڪ (4 °C) سينٽرفيوگريشن آپريشن دوران ڪيو ويو.

سفارش: سڄي عمل دوران ڪمري جي گرمي پد (15-25 ° C) تي ڪم ڪريو، برفاني غسل نه ڪريو ۽ گهٽ درجه حرارت تي سينٽرفيوج.

2. غلط نموني جي بچاءُ يا گھڻي نموني رکڻ جو وقت.

سفارش: نمونن کي -80 °C تي ذخيرو ڪريو يا مائع نائٽروجن ۾ منجمد ڪريو ۽ بار بار منجمد ٿيل استعمال کان پاسو ڪريو؛آر اين اي ڪڍڻ لاءِ تازو ٽشو يا ڪلچر ٿيل سيلز استعمال ڪرڻ جي ڪوشش ڪريو.

3. ناکافي نموني ليسس.

سفارش: جڏهن ٽشو کي هڪجهڙائي ڪرڻ گهرجي، پڪ ڪريو ته ٽشو ڪافي طور تي هڪجهڙائي سان ٺهيل آهي ۽ آر اين اي جي ڇڏڻ جي وضاحت ڪرڻ لاء ٽشو سيلز ڪافي ورهايل آهن.

4. ايليوئنٽ صحيح طرح شامل نه ڪيو ويو آهي.

سفارش: تصديق ڪريو ته RNase-Free ddH₂O شامل ڪيو ويو آھي dropwise کي صاف ڪرڻ واري ڪالمن جھلي جي وچ ۾.

5. مطلق ايٿانول جو صحيح مقدار بفر RL2 يا بفر RW2 ۾ شامل نه ڪيو ويو.

سفارش: هدايتن تي عمل ڪريو، Buffer RL2 ۽ Buffer RW2 ۾ مطلق ايٿانول جو صحيح مقدار شامل ڪريو ۽ کٽ استعمال ڪرڻ کان اڳ چڱيءَ طرح ملايو.

6. ٽشو نموني dosage مناسب نه آهي.

سفارش: استعمال ڪريو 10-20 ملي گرام ٽشو يا (1-5) × 10⁶سيلز في 500 μl بفر RL1، جيئن گھڻي ٽشو استعمال ڪرڻ جي نتيجي ۾ آر اين اي جي گھٽتائي ٿي سگھي ٿي.

7. نامناسب ايليوشن حجم يا نامڪمل اخراج.

سفارش: صاف ڪرڻ واري ڪالمن جو ايليوشن حجم 50-200 μl آهي.جيڪڏهن ايليوشن جو اثر اطمينان بخش نه آهي، ته اڳي گرم ٿيل RNase-Free ddH شامل ڪرڻ کان پوءِ ڪمري جي گرمي پد جي مقرري جو وقت وڌائڻ جي سفارش ڪئي ويندي آهي.₂اي، مثال طور 5-10 منٽ لاء.

8. صاف ڪرڻ واري ڪالمن ۾ بفر RW2 ڌوئڻ کان پوءِ ايٿانول رهجي وئي آهي.

سفارش: جيڪڏهن Buffer RW2 ڌوئڻ کان پوءِ ايٿانول جي رهجي وئي آهي، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن 1 منٽ لاءِ، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن جو وقت 2 منٽ تائين وڌائي سگھجي ٿو، يا صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي ڪمري جي حرارت تي 5 منٽ لاءِ رکي سگهجي ٿو ته جيئن مناسب طور تي ايٿانول کي هٽائي سگهجي.

صاف ٿيل آر اين اي خراب ٿي وئي آهي

صاف ٿيل آر اين اي جي معيار جو تعلق عنصرن سان آهي جهڙوڪ نموني جي حفاظت، آر اين جي آلودگي، ۽ هٿرادو، وغيره.

1. ٽشو جا نمونا وقت ۾ نه رکيا ويا آهن.

سفارش: جيڪڏهن ٽشو جا نمونا يا سيلز گڏ ڪرڻ کان پوءِ بروقت استعمال نه ڪيا ويا آهن، فوري طور تي -80 ° C يا مائع نائٽروجن تي cryopreserve ڪريو.آر اين اي ڪڍڻ لاءِ، جڏهن به ممڪن هجي، نئون ورتو ٽشو يا سيل جو نمونو استعمال ڪريو.

2. ٽشو جي نمونن کي بار بار منجمد ڪرڻ.

سفارش: ٽشو جي نمونن کي ذخيرو ڪرڻ وقت، اهو بهتر آهي ته انهن کي محفوظ ڪرڻ لاء ننڍن ٽڪرن ۾ ڪٽي، ۽ نموني جي بار بار منجمد ٿيڻ ۽ آر اين اي جي خراب ٿيڻ کان بچڻ لاء انهن کي استعمال ڪرڻ وقت انهن مان هڪ ٽڪر ڪڍي ڇڏيو.

3. آپريشن دوران RNase متعارف ڪرايو يا نه پائڻ وارو ڊسپوزيبل دستانو، ماسڪ وغيره.

تجويز: آر اين اي ڪڍڻ جا تجربا بهترين طور تي الڳ الڳ آر اين اي مينيپوليشن ڪمرن ۾ ڪيا ويندا آهن ۽ ميز کي تجربي کان اڳ صاف ڪيو ويندو آهي.

تجربو دوران ڊسپوزيبل دستانو ۽ ماسڪ پائڻ لاءِ آر اين اي جي تباهي کي گھٽائڻ لاءِ جيڪو RNase جي تعارف جي ڪري ٿي.

4. Reagents استعمال دوران RNase سان آلوده آهن.

تجويز: لاڳاپيل تجربن لاءِ نئين اينيمل ٽوٽل آر اين اي آئسوليشن کٽ سان مٽايو.

5. آر اين اي جي ڦيرڦار ۾ استعمال ٿيندڙ سينٽريفيوج ٽيوب، ٽپ وغيره RNase سان آلوده آهن.

سفارش: پڪ ڪريو ته آر اين اي ڪڍڻ ۾ استعمال ٿيندڙ سينٽريفيوج ٽيوب، ٽپس، پائپيٽ وغيره سڀ RNase-مفت آهن.

صاف ٿيل حاصل ڪيل آر اين اي هيٺئين پاسي جي تجربن کي متاثر ڪري ٿو

آر اين اي پيوريفڪيشن ڪالمن ذريعي پاڪ ڪيو ويو آهي، جيڪڏهن لوڻ آئنز، پروٽين جو مواد تمام وڏو آهي ته هيٺئين پاسي واري تجربي کي متاثر ڪندو، جهڙوڪ: ريورس ٽرانسڪرپشن، ناردرن بلٽ وغيره.

1. خارج ٿيل آر اين اي ۾ لوڻ آئن جا باقي بچيل آهن.

سفارش: تصديق ڪريو ته ايٿانول جو صحيح مقدار بفر RW2 ۾ شامل ڪيو ويو آهي ۽ آپريشن لاءِ اشارو ڪيل سينٽرفيوگل اسپيڊ تي 2 صاف ڪرڻ واري ڪالمن واش کي انجام ڏيو؛جيڪڏهن ڪو لوڻ آئن جي باقي رهي ٿي، صاف ڪرڻ واري ڪالمن کي بفر RW2 تي 5 منٽ لاءِ ڪمري جي حرارت تي ڇڏي ڏيو ۽ لوڻ جي آلودگي کي وڌ کان وڌ ختم ڪرڻ لاءِ سينٽرفيوگريشن انجام ڏيو.

2. خارج ٿيل آر اين اي ۾ ايٿانول جي باقيات.

سفارش: پڪ ڪريو ته بفر RW2 ڌوئڻ کان پوء، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن کي سينٽرفيوگريشن جي رفتار تي انجام ڏيو جيڪو آپريشن لاءِ اشارو ڪيو ويو آهي، خالي ٽيوب سينٽرفيوگريشن آپريشن جو وقت 2 منٽ تائين وڌايو جيڪڏهن اڃا تائين ايٿانول باقي رهي ٿي، يا ان کي ڪمري جي گرمي پد تي 5 منٽ لاءِ ڇڏي ڏيو ٽيوبول سينٽريفيوگريشن جي ايم ڪيو ايم کان پوءِ. آئيڊيو

nulceic acid نموني جي قسمن جي الڳ ڪرڻ

Foregene جي آر اين اي آئسوليشن ڪِٽس ھيٺ ڏنل نمونن مان ڪل آر اين اي آئسوليشن/اسٽارڪشن حاصل ڪري سگھن ٿيون: جانورن جو ٽشو، ٻوٽو، سيلز، وائرل، رت، وغيره.

مان ڪٽ کي ڪيئن ذخيرو ڪري سگهان ٿو

24 مهينن لاء ڪمري جي حرارت جي اسٽوريج.