اينٽي باڊيز، جن کي امونگلوبولين (Ig) پڻ سڏيو ويندو آهي، گلائڪوپروٽين آهن جيڪي خاص طور تي اينٽيجنز سان جڙيل آهن.
 
روايتي اينٽي باڊي جي تياري پيدا ڪئي وئي آهي جانورن کي مدافعتي ڪرڻ ۽ اينٽي سيرم گڏ ڪرڻ.تنهن ڪري، اينٽيسيرم عام طور تي ٻين غير لاڳاپيل اينٽيجنز ۽ سيرم ۾ ٻين پروٽين جي اجزاء جي خلاف اينٽي باڊيز تي مشتمل آهي.عام اينٽيجن ماليڪيول اڪثر ڪري ڪيترن ئي مختلف ايپيٽپس تي مشتمل هوندا آهن، تنهن ڪري روايتي اينٽي باڊيز پڻ ڪيترن ئي مختلف ايپيٽپس جي خلاف اينٽي باڊيز جو مرکب آهن.ايستائين جو روايتي سيرم اينٽي باڊيز ساڳيا نسخن جي خلاف هدايت ڪئي وئي اڃا تائين مختلف بي سيل ڪلونز پاران تيار ڪيل هيٽروجنيئس اينٽي باڊيز تي مشتمل آهن.تنهن ڪري، روايتي سيرم اينٽي باڊيز کي پولي ڪلونل اينٽي باڊيز، يا مختصر طور تي پولي ڪلونل اينٽي باڊيز پڻ سڏيو ويندو آهي.
 
مونوڪلونل اينٽي باڊي (مونوڪلونل اينٽي باڊي) هڪ انتهائي يونيفارم اينٽي باڊي آهي جيڪا هڪ بي سيل ڪلون طرفان تيار ڪئي وئي آهي ۽ صرف هڪ مخصوص ايپيٽوپ جي خلاف هدايت ڪئي وئي آهي.اهو عام طور تي تيار ڪيو ويندو آهي هائبرڊوما ٽيڪنالاجي- هائيبرڊوما اينٽي باڊي ٽيڪنالاجي سيل فيوزن ٽيڪنالاجي تي ٻڌل آهي، بي سيلز کي گڏ ڪرڻ جي صلاحيت سان مخصوص اينٽي باڊيز ۽ مائيلوما سيلز کي لامحدود واڌ جي صلاحيت سان بي-سيل هائبرڊوما ۾.هي هائبرڊوما سيل ۾ والدين سيل جون خاصيتون آهن.اهو غير يقيني طور تي ۽ لافاني طور تي ويٽرو ۾ مائيلوما سيلز وانگر وڌي سگهي ٿو، ۽ اهو مخصوص اينٽي باڊيز جهڙوڪ اسپلينڪ لمفوسائيٽس کي گڏ ڪري سگهي ٿو.ڪلوننگ ذريعي، هڪ واحد هائبرڊوما سيل مان نڪتل هڪ مونوڪلونل لائن، يعني هڪ هائبرڊوما سيل لائن، حاصل ڪري سگهجي ٿي.ان ۾ پيدا ٿيندڙ اينٽي باڊيز هڪ ئي اينٽي جينڪ ڊيٽرمننٽ جي خلاف انتهائي هڪجهڙائي رکندڙ اينٽي باڊيز آهن، يعني مونوڪلونل اينٽي باڊيز.
 
اينٽي باڊيز هڪ يا وڌيڪ Y-shaped monomers جي طور تي موجود آهن (يعني، monoclonal antibodies يا polyclonal antibodies).ھر Y-shaped monomer 4 polypeptide زنجيرن تي مشتمل ھوندو آھي، جنھن ۾ ٻه ھڪ جھڙا بھاري زنجير ۽ ٻه ھڪ جھڙا ھلڪي زنجير ھوندا آھن.هلڪو زنجير ۽ ڳري زنجير انهن جي ماليڪيولر وزن جي لحاظ کان رکيو ويو آهي.Y-shaped ڍانچي جو مٿيون حصو متغير علائقو آهي، جيڪو اينٽيجن بائنڊنگ سائيٽ آهي.(Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept کان اقتباس)
 
اينٽي باڊي جي جوڙجڪ
ڳري زنجير
ٿلهي جانورن جي Ig Heavy زنجيرن جا پنج قسم آهن، جن کي يوناني اکر α، δ، ε، γ ۽ μ سان نالا ڏنا ويا آهن.لاڳاپيل اينٽي باڊيز کي IgA، IgD، IgE، IgG ۽ IgM سڏيو ويندو آهي.مختلف ڳري زنجير سائيز ۽ ساخت ۾ مختلف آهن.α ۽ γ ۾ لڳ ڀڳ 450 امينو اسيد شامل آهن، جڏهن ته μ ۽ ε ۾ لڳ ڀڳ 550 امينو اسيد شامل آهن.
هر ڳري زنجير جا ٻه علائقا آهن: مستقل علائقو ۽ متغير علائقو.ساڳئي قسم جون سڀئي اينٽي باڊيون ساڳيون مستقل علائقا آهن، پر مختلف قسمن جي اينٽي باڊيز ۾ فرق آهي.ڳري زنجيرن جا مسلسل علائقا γ، α، ۽ δ ٽينڊم ۾ ٽن Ig ڊومينز تي مشتمل آهن، ان جي لچڪ کي وڌائڻ لاء هڪ ڇڪ واري علائقي سان؛ڳري زنجيرن جا مسلسل علائقا μ ۽ ε 4 Ig ڊومينز تي مشتمل آهن.مختلف بي سيلز پاران پيدا ٿيندڙ اينٽي باڊي جي ڳري زنجير جو متغير علائقو مختلف آهي، پر هڪ ئي بي سيل يا سيل ڪلون پاران پيدا ڪيل اينٽي باڊي جو متغير علائقو ساڳيو آهي، ۽ هر ڳري زنجير جو متغير علائقو اٽڪل 110 امينو اسيد ڊگهو آهي.، ۽ هڪ واحد Ig ڊومين ٺاهيو.
 
هلڪو زنجير
ٿلهي جانورن ۾ صرف ٻه قسم جون روشنيون آهن: ليمبڊا قسم ۽ ڪپا قسم.هر هلڪي زنجير ۾ ٻه ڳنڍيل ڊومين آهن: هڪ مستقل علائقو ۽ هڪ متغير علائقو.نوري زنجير جي ڊيگهه اٽڪل 211 ~ 217 امينو اسيد آهي.هر اينٽي باڊي ۾ موجود ٻه نوري زنجير هميشه ساڳيا هوندا آهن.ٿلهي جانورن لاءِ، هر اينٽي باڊي ۾ هلڪي زنجير جو فقط هڪ قسم آهي: ڪپا يا ليمبڊا.ڪجھ هيٺين فقرن ۾، جهڙوڪ ڪارٽيليگينس مڇيون (ڪارٽيليج مڇي) ۽ بوني مڇين ۾، نوري زنجيرن جا ٻيا قسم جهڙوڪ آئيوٽا (iota) قسم پڻ مليا آهن.
 
Fab ۽ Fc حصن
ايف سي سيڪشن کي اينٽي باڊيز کي ليبل ڪرڻ لاءِ سڌي طرح اينزيمز يا فلورسنٽ رنگن سان ملائي سگهجي ٿو.اهو اهو حصو آهي جتي اينٽي باڊي ELISA جي عمل دوران پليٽ تي پکڙجي ٿي، ۽ اهو پڻ اهو حصو آهي جتي ٻئي اينٽي باڊي کي تسليم ڪيو وڃي ٿو ۽ مدافعتي عمل، اميونوبلوٽنگ ۽ اميونوهسٽو ڪيمسٽري ۾ پابند آهي.اينٽي باڊيز کي ٻن F(ab) حصن ۾ ۽ هڪ Fc ڀاڱي ۾ پروٽوليٽڪ اينزائمز جهڙوڪ پيپين ذريعي هائيڊولائيز ڪري سگهجي ٿو، يا انهن کي پيپسن ذريعي هنج واري علائقي مان ٽوڙي سگهجي ٿو ۽ هڪ F(ab)2 ڀاڱو ۽ هڪ Fc ڀاڱو ۾ هائيڊولائيز ڪري سگهجي ٿو.IgG اينٽي باڊي جا ٽڪرا ڪڏهن ڪڏهن ڏاڍا مفيد هوندا آهن.Fc ڀاڱي جي کوٽ جي ڪري، F(ab) ڀاڱو اينٽيجن سان گڏ نه ٿيندو، ۽ نه ئي اهو vivo مطالعي ۾ مدافعتي سيلز طرفان قبضو ڪيو ويندو.ڇاڪاڻ ته ننڍن ماليڪيولر ٽڪرن ۽ ڪراس-لنڪنگ فنڪشن جي کوٽ (Fc سيگمينٽ جي کوٽ جي ڪري)، Fab سيگمينٽ عام طور تي استعمال ڪيو ويندو آهي ريڊيولابيلنگ لاءِ فنڪشنل اسٽڊيز ۾، ۽ Fc ڀاڱو خاص طور تي هسٽو ڪيميڪل اسٽيننگ ۾ بلاڪنگ ايجنٽ طور استعمال ٿيندو آهي.
 
متغير ۽ مسلسل علائقا
متغير علائقو (V علائقو) H زنجير جي 1/5 يا 1/4 (اٽڪل 118 امينو اسيد جي باقيات تي مشتمل آهي) N-ٽرمينس جي ويجهو ۽ 1/2 (تقريبن 108-111 امينو اسيد جي باقيات تي مشتمل آهي) L زنجير جي N-ٽرمينس جي ويجهو آهي.هر V علائقي ۾ هڪ پيپٽائڊ رنگ هوندو آهي جيڪو انٽرا-چين ڊسلفائيڊ بانڊن مان ٺهيل هوندو آهي، ۽ هر پيپٽائڊ رنگ ۾ لڳ ڀڳ 67 کان 75 امينو اسيد جي باقيات شامل هونديون آهن.V علائقي ۾ امينو اسيد جي جوڙجڪ ۽ ترتيب اينٽي باڊي جي اينٽيجن بائنڊنگ خاصيت کي طئي ڪري ٿي.V علائقي ۾ امينو اسيدز جي هميشه بدلجندڙ قسمن ۽ تسلسل جي ڪري، مختلف پابند اينٽيجن جي خاصيتن سان ڪيتريون ئي قسم جا اينٽي باڊيز ٺهي سگهن ٿيون.L زنجير ۽ H زنجير جي V علائقن کي ترتيب سان VL ۽ VH سڏيو ويندو آهي.VL ۽ VH ۾، ڪجھ مقامي علائقن جي امينو اسيد جي ٺاھڻ ۽ ترتيب ۾ اعلي سطحي تبديلي آھي.انهن علائقن کي هائپر ويريبل ريجنز (HVR) سڏيو ويندو آهي.V علائقي ۾ غير HVR حصن جي امينو اسيد جي جوڙجڪ ۽ ترتيب نسبتا قدامت پسند آهي، جنهن کي فريم ورڪ علائقو سڏيو ويندو آهي.VL ۾ ٽي هائپر ويريبل علائقا آهن، عام طور تي 24 کان 34 ۽ 89 کان 97 تائين امينو اسيد جي باقيات تي واقع آهن.VL ۽ VH جي ٽي HVRs کي ترتيب سان HVR1، HVR2 ۽ HVR3 سڏيو ويندو آهي.ايڪس-ري ڪرسٽل جي تفاوت جي تحقيق ۽ تجزيي اهو ثابت ڪيو ته هائپر ويريبل علائقو حقيقت ۾ اها جاءِ آهي جتي اينٽي باڊي اينٽيجن جڙيل آهي، ان ڪري ان کي complementarity-determining region (CDR) سڏيو وڃي ٿو.VL ۽ VH جي HVR1، HVR2 ۽ HVR3 کي ترتيب سان CDR1، CDR2 ۽ CDR3 سڏيو وڃي ٿو.عام طور تي، CDR3 ۾ اعلي درجي جي هائپر ويريبلٽي آهي.hypervariable علائقو پڻ مکيه جڳھ آھي جتي Ig molecules جا idiotypic determinants موجود آھن.اڪثر ڪيسن ۾، ايڇ زنجير اينٽيجن کي پابند ڪرڻ ۾ وڌيڪ اهم ڪردار ادا ڪري ٿو.
مسلسل علائقو (سي علائقي)H زنجير جي 3/4 يا 4/5 تي (تقريبن امينو اسيد 119 کان سي ٽرمينل تائين) سي ٽرمينس جي ويجهو ۽ 1/2 (تقريبن 105 امينو اسيد جي باقيات تي مشتمل آهي) ايل زنجير جي سي ٽرمينس جي ويجهو.H زنجير جي هر فعلي علائقي ۾ لڳ ڀڳ 110 امينو ايسڊ جي باقيات شامل آهن، ۽ هڪ پيپٽائڊ رنگ تي مشتمل آهي، جيڪو 50-60 امينو ايسڊ جي باقيات تي مشتمل آهي جيڪو ڊسلفائيڊ بانڊن سان ڳنڍيل آهي.هن علائقي جي امينو اسيد جي ٺهڻ ۽ ترتيب نسبتاً هڪ ئي جانور Ig آئوٽائپ L زنجير ۽ ساڳئي قسم جي H زنجير ۾ آهي.ساڳيو، اهو صرف خاص طور تي لاڳاپيل اينٽيجن سان پابند ٿي سگهي ٿو، پر ان جي سي علائقي جي جوڙجڪ ساڳي آهي، اهو آهي، اهو ساڳيو antigenicity آهي.گھوڙي مخالف انسان IgG ثانوي اينٽي باڊي (يا اينٽي اينٽي باڊي) کي ٻن A combination of antibodies (IgG) سان ملائي سگھجي ٿو مختلف exotoxins جي خلاف ٿئي ٿي.هي ثانوي اينٽي باڊيز تيار ڪرڻ ۽ فلورسين، آئسوٽوپس، اينزائمز ۽ ٻين ليبل ٿيل اينٽي باڊيز کي لاڳو ڪرڻ لاءِ هڪ اهم بنياد آهي.
 
 
لاڳاپيل مصنوعات:
سيل سڌو RT-qPCR کٽ